- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y77342
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
38
- 英文名：
RAGE antagonist peptide TFA
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20°C, away from moisture
- 规格：
1 mg 5 mg
化学性质:
规格：1 mg 5 mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
RAGE antagonist peptide TFA分子式：C59H102F3N13O19S
分子量：1386.58
溶解度：H2O : 25 mg/mL (18.03 mM; Need ultrasonic)
储存条件：-20°C, away from moisture
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
产品描述:
RAGE antagonist peptide TFA is an advanced glycation end products (RAGE) antagonist. RAGE antagonist peptide TFA prevents RAGE from binding with several of its most important ligands, including HMGB-1, S100P, and S100A4. RAGE antagonist peptide TFA possesses anti-tumor and anti-inflammatory activities[1][2].RAGE antagonist peptide TFA (RAP) reduces the ability of the ligands to stimulate RAGE activation of NFκB in cancer cells in vitro[1].RAGE antagonist peptide TFA (RAP, 100 µg) inhibits RAGE-mediated Basal NFκB Activity in PDAC cells in vivo[1].RAGE antagonist peptide TFA (RAP) reduces the growth and metastasis of pancreatic tumors and also inhibited glioma tumor growth[1].In mice bearing asthma, RAGE antagonist peptide TFA (RAP; 4 mg/kg; i.p.) blunts airway reactivity, airway inflammation and goblet cell metaplasia, and decreases release of Th2 cytokines. RAGE antagonist peptide TFA also reduces total, cytoplasmic and nuclear levels of β-catenin, enhances β-catenin phosphorylation at Ser33/37/Thr41, which triggers ubiquitination, down-regulated expression of β-catenin targeted genes, and tends to keep β-catenin at the cytomembrane, shifting β-catenin from a signalling active pattern to an adhesive function[2].[1]. Thiruvengadam Arumugam, et al. S100P-derived RAGE antagonistic peptide reduces tumor growth and metastasis. Clin Cancer Res. 2012 Aug 15;18(16):4356-64.[2]. Lihong Yao, et al. The receptor for advanced glycation end products is required for β-catenin stabilization in a chemical-induced asthma model. Br J Pharmacol. 2016 Sep;173(17):2600-13.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
规格：1 mg 5 mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
RAGE antagonist peptide TFA分子式：C59H102F3N13O19S
分子量：1386.58
溶解度：H2O : 25 mg/mL (18.03 mM; Need ultrasonic)
储存条件：-20°C, away from moisture
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
| 产品名称 | RAGE antagonist peptide TFA | 产品货号 | CS-01Y77342 |
| 规格 | 1 mg 5 mg | CAS号 | N/A |
| 含量 | >99.50% | 分子式 | C59H102F3N13O19S |
| 分子量 | 1386.58 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
RAGE antagonist peptide TFA is an advanced glycation end products (RAGE) antagonist. RAGE antagonist peptide TFA prevents RAGE from binding with several of its most important ligands, including HMGB-1, S100P, and S100A4. RAGE antagonist peptide TFA possesses anti-tumor and anti-inflammatory activities[1][2].RAGE antagonist peptide TFA (RAP) reduces the ability of the ligands to stimulate RAGE activation of NFκB in cancer cells in vitro[1].RAGE antagonist peptide TFA (RAP, 100 µg) inhibits RAGE-mediated Basal NFκB Activity in PDAC cells in vivo[1].RAGE antagonist peptide TFA (RAP) reduces the growth and metastasis of pancreatic tumors and also inhibited glioma tumor growth[1].In mice bearing asthma, RAGE antagonist peptide TFA (RAP; 4 mg/kg; i.p.) blunts airway reactivity, airway inflammation and goblet cell metaplasia, and decreases release of Th2 cytokines. RAGE antagonist peptide TFA also reduces total, cytoplasmic and nuclear levels of β-catenin, enhances β-catenin phosphorylation at Ser33/37/Thr41, which triggers ubiquitination, down-regulated expression of β-catenin targeted genes, and tends to keep β-catenin at the cytomembrane, shifting β-catenin from a signalling active pattern to an adhesive function[2].[1]. Thiruvengadam Arumugam, et al. S100P-derived RAGE antagonistic peptide reduces tumor growth and metastasis. Clin Cancer Res. 2012 Aug 15;18(16):4356-64.[2]. Lihong Yao, et al. The receptor for advanced glycation end products is required for β-catenin stabilization in a chemical-induced asthma model. Br J Pharmacol. 2016 Sep;173(17):2600-13.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| D-Carnitine | (Pro³⁰,Tyr³²,Leu³⁴)-Neuropeptide Y (28-36) |
| (Ser(PO₃H₂)³²³)-Hrr25 (312-323) (S. cerevisiae) | 总蛋白S(TPS)检测试剂盒 |
| (Tyr⁰)-C-Peptide (dog) | 血清剥夺反应相关蛋白(SDPR)试剂盒elisa |
| (Val³⁴)-Amyloid β-Protein (1-40) | 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)检测试剂盒 |
| 1,2-Distearoyl-rac-glycero-3-phosphocholine | 中性粒细胞防御素1-3(HNP1-3)检测试剂盒elisa |
| 1-O-Octadecyl-2-O-methyl-rac-glycero-3-phosphocholine | 血浆抗凝蛋白S(PS)试剂盒ELISA |
| 3β[N-(N’,N’-Dimethylaminoethane)-carbamoyl]cholesterol | 血浆抗凝蛋白C(PC)ELISA检测试剂盒 |
| 4-Methyl-benzhydrylamine resin (100-200 mesh, 0.70-1.30 mmol/g) . HCl | Sex Determining Region Y Box Protein 3(SOX3)ELISA Kit |
| 5-TAMRA-Amyloid β-Protein (1-42) | 细胞纤维连接蛋白(cFn)ELISA检测试剂盒 |
| Ac-(6-O-stearoyl)-muramyl-Ala-D-Glu-NH₂ | 血浆纤维连接蛋白(pFN)试剂盒ELISA |
| Ac-Arg-Gly-Lys-AMC | 补因子D(CFD)检测试剂盒 |
| Ac-D-Ala-D-lactic acid | 凝血酶原(PT)检测试剂盒elisa |
| Acetyl-(D-Phe²,Lys¹⁵,Arg¹⁶,Leu²⁷)-VIP (1-7)-GRF (8-27) | RAGE antagonist peptide TFA可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)试剂盒elisa |
| NAADP (sodium salt) | 凝血因子Ⅶ(FⅦ)检测试剂盒 |
| 白介素13(IL-13)检测试剂盒 | 凝血酶(TM)ELISA检测试剂盒 |
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,with the development of ESI-MS and MALDI-MS.Peptide mass fingerprinting uses the peptide masses obtained by digestion to search the protein and DNA databases,to find proteins that show a similar theoretical digest pattern (see eg .,Shevchenko et al.1996a and b
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Utilizing Peptide SPOT Arrays to Identify Protein Interactions
., Langeberg, L.K., Fayos, R., Jennings, P.A., and Scott, J.D. 2003. Bioinformatic design of A‐kinase anchoring protein‐in silico: A potent and selective peptide antagonist of type II protein kinase A anchoring. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100:4445‐4450
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