- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y76273
- 国产
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
38
- 英文名：
Fmoc-Ala-Glu-Asn-Lys-NH2
- CAS号：
220701-06-4
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20°C, protect from light, stored under nitrogen
- 规格：
5 mg 10 mg
规格：5 mg 10 mg
CAS：220701-06-4
别名：N/A
化学名：N/A
Fmoc-Ala-Glu-Asn-Lys-NH2分子式：C33H43N7O9
分子量：681.74
溶解度：DMSO: 100 mg/mL (146.68 mM; ultrasonic and warming and heat to 80°C)
储存条件：-20°C, protect from light, stored under nitrogen
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
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本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
| 产品名称 | Fmoc-Ala-Glu-Asn-Lys-NH2 | 产品货号 | CS-01Y76273 |
| 规格 | 5 mg 10 mg | CAS号 | 220701-06-4 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C33H43N7O9 |
| 分子量 | 681.74 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Fmoc-Ala-Glu-Asn-Lys-NH2 is a selective asparagine endopeptidase (AEP) inhibitor peptide and suppresses amyloid precursor protein (APP) cleavage. AEP, a pH-controlled cysteine proteinase, is activated during ageing and mediates APP proteolytic processing[1].Fmoc-Ala-Glu-Asn-Lys-NH2 antagonizes APP processing by AEP, whereas other small molecular inhibitors and inactive peptide AEQK were without effect[1].[1]. Zhang Z, et al. Delta-secretase cleaves amyloid precursor protein and regulates the pathogenesis in Alzheimer's disease. Nat Commun. 2015;6:8762. Published 2015 Nov 9.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| Acetyl-Hirudin (55-65) (desulfated) | Boc-Gly-Gly-Gly-OH |
| Boc-Hyp-OBzl | TBC1域家族成员10C检测试剂盒 TBC1D10C ELISA Kit |
| Boc-L-thiazolidine-4-carboxylic acid | TATA框结合蛋白关联因子2检测试剂盒 TAF2 ELISA Kit |
| Boc-Met-ONp | TATA框结合蛋白关联因子1检测试剂盒 TAF1 ELISA Kit |
| Boc-p-azido-D-Phe-OH | TATA框结合蛋白关联因子13检测试剂盒 TAF13 ELISA Kit |
| Boc-Phe-Tyr-OH | TATA盒结合蛋白检测试剂盒 TBP ELISA Kit |
| Boc-tBu-D-Gly-OH | Taperin蛋白检测试剂盒 TPRN ELISA Kit |
| Boc-Tyr(Et)-OH | Anti-Thyroid Microsome Antibody,ATMA/TMAB ELISA Kit |
| Boc-β-cyclopropyl-Ala-OH . DCHA | TBP结合转录向下调节因子1检测试剂盒 DR1 ELISA Kit |
| Bz-Ala-OH | Tectonic1蛋白检测试剂盒 TCTN1 ELISA Kit |
| Bzl-N-Me-Ser-OH | Tectonic2蛋白检测试剂盒 TCTN2 ELISA Kit |
| C5a Anaphylatoxin (37-53) (human) | Tectonic3蛋白检测试剂盒 TCTN3 ELISA Kit |
| Cecropin A (1-8)-Melittin (1-18) amide | Fmoc-Ala-Glu-Asn-Lys-NH2TERF1相互作用核因子2检测试剂盒 TINF2 ELISA Kit |
| 5α-Androst-16-en-3α-ol | Tescalcin蛋白检测试剂盒 TSC ELISA Kit |
| TNF受关联因子3检测试剂盒 TRAF3 ELISA Kit | Thimet脱寡肽酶1检测试剂盒 THOP1 ELISA Kit |
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文献和实验[hCys-（N-Me）Phe -Tyr-D-Trp-Lys-Val]的合成也是应用HBTU为缩合剂，反应路线如下： 2.3 Bop法 McMurray等以Cyclo（Asp-Asn-Glu-Tyr-Ala-Ala-Arg-Gln-D-Phe-Pro）（Tyr I+1）为研究对象，以便确定Tyr I+1的哪些位置对蛋白酪氨酸激酶的亲和性是必不可少的，以及哪些氨基酸对活性贡献最大，以Bop/HOBt为复合缩合剂，在1mmol/L浓度下，合成了一系列Tyr I+1类似物，并经磷酸化和亲和力实验，发现6位
Thr T ACA Thr T ACG Thr T AAU Asn N AAC Asn N AAA Lys K AAG Lys K AGU Ser S AGC Ser S AGA Arg R AGG Arg R G GUU Val V GUC Val V GUA Val V GUG Val V GCU ALA A GCC ALA A GCA ALA A GCG ALA A GAU Asp D GAC Asp D GAA Glu E GAG Glu E GGU Gly G GGC Gly G GGA
GLU ASN TYR CYS ASN SEQRES 1 B 30 PHE VAL ASN GLN HIS LEU CYS GLY SER HIS LEU VAL GLU SEQRES 2 B 30 ALA LEU TYR LEU VAL CYS GLY GLU ARG GLY PHE PHE TYR SEQRES 3 B 30 THR PRO LYS ALA SEQRES 1 C 21 GLY ILE VAL GLU GLN CYS
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