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现货
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两年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
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-80 ℃
- 规格:
200μl
产品简介:
碧云天生产的BL21-Gold(DE3)pLysS甘油菌(BL21-Gold(DE3)pLysS Glycerol Stock),是取在对数生长期的BL21-Gold(DE3)pLysS菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成,可以直接划平板或小量、大量培养。本菌株来源于E. coli B,是BL21系列细胞的改进版,可同时用作蛋白表达菌株和质粒克隆菌株,同样适用于T7启动子(T7 promoter)调控目的基因表达的pET系列等原核表达质粒。
pLysS质粒编码产生的T7溶菌酶,是一种T7 RNA聚合酶抑制剂,能够有效降低目的基因的基础表达水平,严格控制毒性蛋白的表达,因此本菌株可少量表达对细菌有毒性或生长抑制的蛋白。pLysS质粒的起始复制起点是p15 Origin,这使得该质粒能够和pUC-以及pBR322-衍生的质粒互相共存。
BL21-Gold(DE3)pLysS,具有Hte表型,该表型有效增加了细胞的质粒转染效率;本菌株内的endonuclease I (endA)编码基因失活,可避免endA在大部分质粒小提时对质粒DNA的快速降解,因此本菌株可以产生高质量的小提DNA,直接用于扩增克隆蛋白表达构建质粒。
BL21-Gold(DE3)pLysS缺失位于细胞质中的Lon蛋白酶(Lon protease)和胞外膜上的OmpT蛋白酶(OmpT protease),能有效避免重组表达蛋白的降解,被广泛用作外源蛋白的表达菌株。
BL21-Gold(DE3)pLysS菌株具有四环素和氯霉素抗性。氯霉素抗性由pLysS质粒所携带。
BL21-Gold(DE3)pLysS菌株基因型:E. coli B F- dcm+ Hte ompT hsdS(rB- mB- ) gal λ(DE3) [pLysS Camr]a endA Tetr
BL21-Gold(DE3)pLysS菌株核酸酶表达水平较高,在利用其进行被转化质粒提取时,为充分避免核酸酶的影响,可使用碧云天生产的质粒小量抽提试剂盒(通用型) (D0007S或D0007M)、质粒中量抽提试剂盒(通用型) (D0020)或质粒大量抽提试剂盒(通用型) (D0028)进行质粒抽提。
本菌株可以使用常规的LB培养基或SOC培养基进行培养。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。-80℃可以长期保存。
注意事项:
使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下,菌体会逐渐沉淀至管底,请务必注意适当混匀后使用。
为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验) 3:BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr 4:JM109菌株 该菌株在使用pUC系列
) 3:BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr 4:JM109菌株 该菌株在使用pUC系列
【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3) 3:BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-
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