兔红细胞膜蛋白(EMP)ELISA试剂盒

兔红细胞膜蛋白(EMP)ELISA试剂盒  

用途：
主要用于定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其他相关生物液体中的含量。

产品保存：
2-8℃、有效期6个月,我司单核细胞趋化蛋白1(MCP1)酶联试剂盒均为批次，您可放心选购。

规格：48T/96T
有效期：6个月
优势：灵敏性高，性，吸附均匀，吸附性好，回收利用率高

性能:
1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2．灵敏度：检测浓度小于10 pg/ml。
3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

使用范围：此产品供科研实验使用，不得用于临床。

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度

洗板方法

手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。 

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 
 

兔红细胞膜蛋白(EMP)ELISA试剂盒  

试剂盒特点
1.专一性强。
抗原与抗体的反应是专一反应，而酶技术以反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。
由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射测定法。
3.样品易保存。
经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。
对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。

5.可以定量测定。
溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。
如有成千上万份样品需要进行检测，酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。
对没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置.

操作步骤：
1. 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
4. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。避免光照。

计算

   以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

*特别提醒*
1.取样和存样所用的冻存管、离心管、吸头等需高温灭菌处理；
2.所有存样管口需以封口膜封好；
3.所有样品管壁需要用防水记号笔清晰标明编号（便于区分即可）