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现货
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上海经科化学科技有限公司
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5µg
pLenti-C15orf48-sgRNA (C15orf48基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性,全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除,以及通过puromycin筛选稳定细胞株;也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装,然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。

图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得,sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的C15orf48基因敲除的质粒(L12550 pLenti-C15orf48-sgRNA)、慢病毒(L12551 C15orf48 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L12552 C15orf48 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L12553 C15orf48 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L12554 C15orf48 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
C15orf48基因的基本信息如下:
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | C15orf48 | 84419 | BC021173 | NM_032413 |
| About the gene | |
| Official Symbol | C15orf48 |
| Previous Symbol | - |
| Official Full Name | chromosome 15 open reading frame 48 |
| Synonyms | NMES1; MIR147BHG |
| Location | 15q21.1 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | Q9C002 |
| Pathway/Library | Lung Cancer Growth Related Genes Library |
| Gene Summary | This gene was first identified in a study of human esophageal squamous cell carcinoma tissues. Levels of both the message and protein are reduced in carcinoma samples. In adult human tissues, this gene is expressed in the the esophagus, stomach, small intestine, colon and placenta. Alternatively spliced transcript variants that encode the same protein have been identified. |
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文献和实验园网友whomso:这个具体的原理我也不太清楚,不过在转染过程中通常认为转染效率是一致的,如果内参和实验的比例是1:5,我觉得可以认为转到宿主细胞中的比例也是1:5,但是这两种质粒的表达可能不是完全一样的,因此蛋白的比例就不一定是多少了丁香园网友swy19523:there is Omicslink(TM)IRES bicistronic ORF expression vector can meet you need.OmicsLink™; Bicistronic (IRES)ORF
培养基 X ul DMEM 培养基 X ul DMEM 培养基 X ul 总体积 50ul 总体积 50ul 总体积 50ul 3) 准备转染试剂稀释液: Polyfect-V 转染试剂 4.8ula DMEM 培养基 145.2ul 4) 将质粒稀释液和转染试剂稀释液分别混匀。取 50ul 转染试剂稀释液分别加入两组质粒稀释液中,充分混匀,室温孵育 15 min。 5) 将转染液加入 293T 细胞。 6) 48 小时后检测
human full length protein coding ORFs ; ; ORF2: ; ;eGFP eCFP eYFP Luciferase Biotin Ligase ; ;UBC9 HA-Sumo His-AviTag-ubiquitin Neomycin Human ORFs zhaolifei认为: 不知道楼主注意到没有:质粒的不相容性,具有相同复制起始
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