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至少一年有效
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现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
1μg/100μg
| 规格: | 1μg | 产品价格: | ¥888.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100μg | 产品价格: | ¥1169.0 |
产品简介:
pp53-TA-GLuc-Dura (报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测p53转录活性水平的报告基因质粒。pp53-TA-GLuc-Dura是以碧云天的pGLuc-Dura-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个p53结合位点,可以高灵敏度地检测p53的激活水平。
pGLuc-Dura-TA (报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行分泌型、高稳定性、非ATP依赖的Gaussia-Dura Luciferase (Gluc-Dura)萤光素酶报告基因检测的新一代质粒,该报告基因质粒在pGL6-TA (D2105)的基础上进行了改造,用了蛋白表达水平更高、萤光更稳定的突变型(mutant, Mut)的Gaussia-Dura Luciferase萤光素酶报告基因对原firefly luciferase进行了替换。同时该质粒也延续了pGL6-TA的优势,即与Promega pGL3系列质粒相比,对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
Gaussia Luciferase是分离于夏威夷水域的一种大型海洋桡脚类(Copepod)动物(Gaussia princeps)的新型萤光素酶。Gaussia Luciferase为单条肽链的单体酶,其分子量较小(20kD),且具有分泌性信号肽,可通过内质网分泌到细胞外。因此在使用Gaussia Luciferase的报告基因载体转染哺乳动物细胞进行表达时,无需裂解细胞,可直接使用细胞培养基上清进行萤光素酶活性的实时检测(当然也可以进行细胞裂解以分析细胞裂解中的萤光素酶活性)。
Gaussia Luciferase萤光素酶催化底物腔肠素的氧化反应并且发光(480nm)。与其他萤光素酶相比,使用Gaussia Luciferase作为报告基因有更多的优势:分泌型萤光素酶,可直接取上清检测,无须裂解细胞;发光强度高,是其它萤光素酶的1000倍;反应无须ATP,不受ATP影响;稳定性高,对温度、pH值等耐受性强。
与野生型Gaussia Luciferase相比,突变型Gaussia-Dura Luciferase在哺乳动物细胞中进行表达时,不仅保留了Gaussia Luciferase的优势和特点,还具有更高的蛋白表达水平和更好的萤光稳定性。
萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
pp53-TA-GLuc-Dura质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| p53 response element | 20-73 |
| Minimal TA promoter (pTA) | 96-118 |
| GLuc (MT) reporter gene | 160-717 |
| SV40 late poly (A) signal | 752-973 |
| SV40 early enhancer/promoter | 1021-1439 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor) coding region | 1464-2258 |
| Synthetic poly (A) signal | 2283-2331 |
| Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 2398-2417 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 2655 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 3446-4306 |
| Synthetic poly (A) signal/transcriptional pause site | 4411-4564 |
| Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 4513-4532 |
pp53-TA-GLuc-Dura质粒(4564bp)的图谱如下:

pp53-TA-GLuc-Dura的多克隆位点的详细图谱见说明书
pp53-TA-GLuc-Dura中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pp53-TA-GLuc-Dura)包括:
| AatII | AclI | AflII | AscI | AseI | AsiSI | BmgBI |
| BmtI | BsaAI | BsaI | BsiWI | BspEI | BsrGI | BssHII |
| CspCI | DraIII | Eco53kI | EcoRI | EcoRV | MluI | NdeI |
| NheI | PacI | PaeR7I | PflFI | PflMI | PmeI | PmlI |
| PspXI | RsrII | SacI | SbfI | SnaBI | SwaI | Tth111I |
| XcmI | XhoI | ZraI |
pp53-TA-GLuc-Dura中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pp53-TA-GLuc-Dura)包括:
| Acc65I | G`GTAC,C | 14 | BstZ17I | GTA|TAC | 4029 |
| AflIII | A`CRYG,T | 2597 | Bsu36I | CC`TNAGG | 3875 |
| AgeI | A`CCGG,T | 2268 | EcoNI | CCTNN`N,NNAGG | 1938 |
| AleI | CACNN|NNGTG | 3439 | Esp3I | CGTCTCN`NNNN, | 4361 |
| ApaI | G,GGCC`C | 1534 | FspI | TGC|GCA | 1022 |
| ApoI | R`AATT,Y | 827 | HindIII | A`AGCT,T | 85 |
| AvaI | C`YCGR,G | 63 | HpaI | GTT|AAC | 882 |
| BaeI | ,(N)5`(N)10ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5` | 1664 | KpnI | G,GTAC`C | 19 |
| BamHI | G`GATC,C | 984 | MfeI | C`AATT,G | 891 |
| BbvCI | CC`TCA,GC | 2149 | NotI | GC`GGCC,GC | 3417 |
| BciVI | GTATCC(N)5,N` | 2799 | NruI | TCG|CGA | 265 |
| BcoDI | GTCTCN`NNNN, | 4361 | PciI | A`CATG,T | 2597 |
| BglI | GCCN,NNN`NGGC | 9 | PsiI | TTA|TAA | 862 |
| BglII | A`GATC,T | 75 | PspOMI | G`GGCC,C | 1534 |
| BpmI | CTGGAG(N)14,NN` | 338 | PvuII | CAG|CTG | 1094 |
| BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 155 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 5 |
| BsmAI | GTCTCN`NNNN, | 4361 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 1680 |
| BsmBI | CGTCTCN`NNNN, | 4361 | SmaI | CCC|GGG | 65 |
| BsoBI | C`YCGR,G | 63 | SpeI | A`CTAG,T | 4348 |
| BspHI | T`CATG,A | 3317 | SrfI | GCCC|GGGC | 65 |
| BssSI | C`ACGA,G | 2770 | StuI | AGG|CCT | 1417 |
| BstBI | TT`CG,AA | 2333 | TspMI | C`CCGG,G | 63 |
| BstEII | G`GTNAC,C | 3444 | XmaI | C`CCGG,G | 63 |
| BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 3437 | XmnI | GAANN|NNTTC | 421 |
pp53-TA-GLuc-Dura质粒可使用的测序引物序列如下:
RVprimer3 (4513-4532): CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pp53-TA-GLuc-Dura的全序列信息:D2225 pp53-TA-GLuc-Dura(报告基因质粒).txt。
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验xiongran 急求ISRE报告基因质粒,干扰素信号通路的报告基因,愿拿其它质粒作为交换! shuyangsy1986 大哥,现在你弄到ISRE的报告基因的质粒没有啊,还有β-干扰素的啊,我也需要啊,先谢了啊 xiongran 几百年前的事情了,没有求到,我都不做这个了 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
【求助】请教大家一个关于报告基因质粒瞬时转染与报告基因表达的问题,问题比较长,谢谢
lsdcfhyj 想请教大家,在我研究的信号转导通路中,转录因子要形成二聚体转移到核内与调控序列结合启动后续目的基因的表达,报告基因质粒含转录因子调控序列和荧光素酶基因,我在想如果用瞬时转染的话,那么质粒只在细胞质之中,并未整合到核基因组中,转录因子又必须是要转入核内与调控序列结合启动荧光素酶表达的,那瞬时转染质粒的细胞能用于报告基因分析吗? woxingwosu 用瞬时转染是可以用来做报告基因分析的,这类的例子不在
viola2010 您好,请问mice bearing a β-catenin-responsive lacZ reporter gene 是什么意思?如何构建? zhujoker 就是老鼠带有β-catenin反应的一个lacZ报告基因,检测β-catenin的变化 viola2010 谢谢版主 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验
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