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- 文献和实验
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- 保存条件:
-20°-20°
- 保质期:
1-3年
- 库存:
999
- 供应商:
亦高生物
- CAS号:
881005-91-0
- 规格:
M9130-250MG

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文献和实验(=10 mM) 4.08 mg 4MUG Make Extraction Buffer, Assay Buffer fresh and keep on ice 4MUG = 4-methylumbelliferyl b-D-glucuronide Also prepare: Kontes homogenisers (for eppen tubes) 4 eppen tubes per sample 1:5 Bradford
蛋白质纯化实验中,将会测定 b-glucuronidase (GUS) 的活性,是利用 p-nitrophenyl b-D-glucuronide 为基质,加入酵素反应后所释出之 p-nitrophenol 在碱性下呈现黄色,可测定 415 nm 之吸光度,利用 Beers Law 即可计算求得反应物之生成量。 本实验将利用已知浓度之 p-nitrophenol,测定其 A415,以求取 p-nitrophenol 在 GUS 活性测定条件下之 消光
2. 染色步骤 (1)染色:加入适量配制好的GUS 染液于24孔板的孔中,将待测样品浸到GUS染液中,将24孔板置于37℃保温箱中放置6 h。 (2)漂洗:先后用50%,70%,100%的乙醇漂洗样品,每次浸泡5分钟。 (3)脱色:加入100%乙醇浸泡直至完全脱色。 (4)记录:在体视显微镜下拍照记录。 二、GUS报导基因的定量检测 GUS 能与底物MUG(分子量352.3,4-甲基伞型酮-β-葡萄糖醛酸苷,4-methylumbelliferylβ-D-glucuronide
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