- ￥6171.22
- Sigma
- 美国
- H-126-1ML
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°-20°
- 保质期：
1-3年
- 库存：
999
- 供应商：
亦高生物
- CAS号：
566-76-7
- 规格：
H-126-1ML
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文献和实验有利于连接酶的活性。但是在这个温度下，粘性末端的氢键结合是不稳定的。因此人们找到了一个折中的温度，即12~16℃，连接12~16h （过夜），这样既可最大限度地发挥连接酶的活性，又兼顾到短暂配对结构的稳定。 pMD18-T Vector 是一种高效克隆PCR 产物（TA Cloning）的专用载体。该载体由pUC18 载体改建而成，在pUC18 载体的多克隆位点处的XbaⅠ和SalⅠ识别位点之间插入了EcoR V识别位点，用EcoR V进行酶切反应后，再在两侧的3’端添加“T”而成
，将管倒置，使乙醇充分流出。沉淀用1ml 0.05Mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液溶解，加入0.5ml~1ml 抗IgG抗体溶液(含抗体15mg左右)，放在冰箱内过夜后，加KH 2 PO 4 ，使近中性即可应用。 氧化法 采用过碘酸钠，过碘酸钠是强氧化剂，能将HRP的甘露糖部分(与酶活性无关的部分)的羟基氧化成醛基，然后与抗体的氨基结合,形成酶标抗体。 （1）氧化法操作过程如下：将5mgHRP
NaCl，混匀，冰浴10分钟，沉淀双螺旋质粒DNA。 15.12,000r/min离心10分钟，去上清，加入1mL 75%乙醇，洗涤沉淀。 16.12,000r/min离心10分钟，去上清，吸出痕量剩余乙醇，风干。 17.加入600μL TE溶液溶解沉淀。 18.酚、酚：氯仿：异戊醇、氯仿：异戊醇各抽提一次，去除蛋白。 19.将上清转移至另一离心管，加入1/10体积3M NaAc，2倍体积无水乙醇，4℃沉淀10分钟。 20.12,000r/min 离心10分钟
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