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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
147
- 英文名:
Daudi-LUC/人Burkitt's
- 生长状态:
悬浮细胞
- 运输方式:
快递运输
- 细胞形态:
淋巴母细胞
- 物种来源:
人
- 组织来源:
外周血;B淋巴母细胞;Burkitt's淋巴瘤
- 规格:
1x10⁶cells/T25或1mL冻存管
| 一、基本信息 |
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| 细胞名称 |
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| 细胞规格 |
1x10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管 |
| 种属来源 |
人 |
| 组织来源 |
外周血;B淋巴母细胞;Burkitt's淋巴瘤 |
| 细胞形态 |
淋巴母细胞 |
| 细胞简介 |
Luciferase Daudi细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加抗生素维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。Daudi-LUC细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。1967年五月E. Klein and G. Klein从一位16岁黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立了Daudi细胞株。 表面免疫球蛋白阳性(sIg+)。Β2-微球蛋白阴性,EBNA阳性,并有衣壳抗原VCA。细胞株携带EB病毒。 Daudi是典型的B淋巴母细胞,广泛应用于白血病发生机理的研究。 |
| puro药筛浓度 |
Daudi-LUC细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中可不用再添加puro,如若担心抗性随着传代时间降低,可定期用0.2ug/ml浓度puro维持 |
| 生物安全等级 |
2 |
| 生长特性 |
悬浮细胞 |
| 生长条件 |
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
| 培 养 基 |
RPMI-1640+20% FBS+PS |
| 冻存条件 |
无血清冻存液,液氮储存 |
| 细胞货期 |
2周左右 |
| 供应范围 |
仅用于科研使用,不得用于其它用途 |
| 二、细胞培养操作 |
|
| T25瓶 |
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| 收货处理 |
观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态 |
| 传代密度 |
细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 |
| 传代比例 |
首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 |
| 传代方法 |
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。 c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 |
| 注意事项 |
1. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2. 因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。 |
| 冻存管 |
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| 收货处理 |
到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏 |
| 传代密度 |
第二天换液并检查细胞密度 |
| 传代比例 |
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶 |
| 传代方法 |
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)第二天换液并检查细胞密度。 |
| 注意事项 |
1. 收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存。 2. 为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。 |
| 三、细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 |
无血清冻存液,液氮储存 |
| 细胞密度 |
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例 |
| 冻存方法 |
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
| 四、售后服务 |
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| 细胞予重发 |
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。 2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。 3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。 4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。 5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。 6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。 |
| 细胞不重发 |
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。 2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。 3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。 4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。 5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。 6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。 |

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文献和实验三句话读懂一篇 CNS!首次提取超 100 万年的 DNA;轻轻一喷,瞬时改变作物性状...
见的非霍奇金淋巴瘤形式。在美国,每年估计有 27,000 名新确诊的弥散性大 B 细胞淋巴瘤患者,其中约有 6,500 名患者在二线或以上治疗后复发或难治。 2021 年 2 月 20 日,宾夕法尼亚大学艾布拉姆森癌症中心 Elise A. Chong 等研究人员在 NEJM 上发表研究论文 Five year outcomes for refractory B-Cell Lymphomas with CAR T-cell Therapy,该工作报告了 嵌合抗原受体(CAR)T 细胞疗法治疗非霍奇金淋巴瘤
待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒;2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等;3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染,设置不同的检测时间点,一般为24h/48h;4、外界干预: 转染后,可进行物理/化学/病毒等的相应刺激;5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作;6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。三、荧光素酶报告基因的优点
[6] 。本研究目的在于利用基因工程方法将鼠源性单克隆抗CD20抗体HI47可变区和人源抗体恒定区连接起来,构建嵌合抗CD20抗体Fab′和F(ab)′2片段,以降低鼠源性抗体的免疫源性。我们构建了人源化的抗CD20抗体Fab′和F(ab)′2片段的载体,可在大肠杆菌中高效可溶性分泌表达,并比较了二者的体外活性,结果均证实了Fab′和F(ab)′2片段具有抑制B淋巴肿瘤细胞生长的活性,这无疑为B淋巴瘤的临床治疗提供了有利的工具。一、实验材料与方法1、细胞与蛋白人B淋巴瘤细胞系Raji与Daudi细胞由本室保存
技术资料









