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蓝白斑筛选Kit-1(即用型,Amp)

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  • ¥360 - 1980
  • Solarbio已认证
  • IK-BWS-1
  • 北京
  • 2025年07月16日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
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      999

    • CAS号

      现询

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • 保存条件

      -20°C

    • 规格

      3*5ml/3*10ml /1Kit

    规格:3*5ml产品价格:¥360.0
    规格:3*10ml 产品价格:¥1080.0
    规格:1Kit产品价格:¥1980.0
    本 Kit 是 Solarbio 专为蓝白斑筛选设计的试剂盒。本套餐精选了 2 种经典的可用于蓝白斑筛选的基础试剂
    和高品质的抗生素,旨在为客户构建“一站式服务平台”,省时省力省心。在库产品均通过生物安全检测和
    产品质量检测,性能稳定有效、批间差异小、具有良好的生物活性,并且已有大量文献多方验证,品质可靠。
    IPTG 为安慰性诱导物,X-gal 为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG 可诱导载体 Lac 操纵子
    DNA 区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α
    互补)。实现α互补的细菌铺在含有 X-gal 生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源 DNA 插入质粒的多
    克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。

    产品组份:
    试剂盒组份 规格 保存
    试剂一 20mg/mL X-gal 1mL -20℃,避光
    试剂二 50mg/mL IPTG 1mL -20℃,避光
    试剂三 100mg/mL Amp 1mL -20℃,避光

    注:
    a. 本产品组分均为无菌规格,无需再进行除菌处理。
    b. 在使用前,请瞬时离心各管小剂量试剂,以免损失。
    产品特点
    1. 本套装为即用型 Kit,无需客户再进行配制,可直接使用。灵活定制。
    2. 灵活定制。客户可以根据自己的实验需求删减或添加其他所需的化合物,定制专属 Kit。也可以定制规格
    和包装。
    3. 库存充足,现货发送,性价比高。

    使用说明(仅供参考)
    直接加入培养基中使用(以 100mL 的含琼脂培养基为例)
    1. 高压灭菌培养基,在超净台中冷却至 55℃左右(即:培养基摸着略烫手但未凝固)。
    2. 在还未凝固的的培养基中,快速加入 500μL 的 试剂一、250μL 的试剂二和 100μL 的 试剂三,充分混
    匀。
    3. 倒平板,制作成含 X-Gal、IPTG 和 抗生素 的平板培养基。

    注:a.不可以先加入 X-gal、IPTG 和 抗生素后,再去高压灭菌。
    b.高压灭菌后的培养基必需冷却至 55℃以下时,才可以加入 X-gal、IPTG 和 抗生素。
    直接加入平板上使用(以 90mM 的平板为例)
    1. 高压灭菌含琼脂的培养基,在超净台中倒平板。
    2. 待平板充分凝固后,在平板上加入 40μL 试剂一、16μL 试剂二、10μL 试剂三,充分涂布。
    3. 待涂布的液体干后即可使用。
    注:具体涂布用量可根据实验结果进行调整。

    蓝白斑筛选
    1. 细菌铺板后,37℃培养倒置平板过夜,可根据长出菌落的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体。
    注:白色菌落为具有 DNA 插入片段的基因重组体。
    2. 过夜培养后,若显色不明显,可在 4℃冰箱中放置 1-2 h。一段时间后蓝白斑显示会比较明显,便于挑选。

    注意事项
    1. X-Gal、IPTG 和 抗生素均对温度敏感,高温会使其快速失活。
    2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
    3. 请勿存放于普通住宅区。
    4. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

    常见问题

    没有蓝斑
    1. 载体处理的好,实验很成功,全是阳性克隆。
    2. 使用的培养基含有乳糖或葡萄糖,因为半乳糖苷酶会分解乳糖,导致不能与 X-gal 反应,而葡萄糖不会
    诱导融合基因的表达。

    没有白斑
    1. 外源目的基因没连接上,可能有外源目的基因的问题,如片段过大,或者是载体的问题。
    2. 实验操作过程中抑菌做得不好,都是杂菌。
    3. 插入的外源目的基因片段较短,且插入后的基因读码框恰好和 lacZ 基因相吻合。

    无菌落生长
    1. 感受态细胞状态不好,或操作过程中过于粗暴。
    2. IPTG 使用浓度太高,IPTG 对菌体是有毒性的。
    3. 抗生素使用浓度过高
     
    产品细节图片1
     

    注意事项

    Considerations

    1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

    2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

    3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

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    图标文献和实验
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