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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- CAS号:
现询
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 保存条件:
-20°C
- 规格:
3*5ml/3*10ml /1Kit
| 规格: | 3*5ml | 产品价格: | ¥360.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 3*10ml | 产品价格: | ¥1080.0 |
| 规格: | 1Kit | 产品价格: | ¥1980.0 |
和高品质的抗生素,旨在为客户构建“一站式服务平台”,省时省力省心。在库产品均通过生物安全检测和
产品质量检测,性能稳定有效、批间差异小、具有良好的生物活性,并且已有大量文献多方验证,品质可靠。
IPTG 为安慰性诱导物,X-gal 为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG 可诱导载体 Lac 操纵子
DNA 区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α
互补)。实现α互补的细菌铺在含有 X-gal 生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源 DNA 插入质粒的多
克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。
产品组份:
试剂盒组份 规格 保存
试剂一 20mg/mL X-gal 1mL -20℃,避光
试剂二 50mg/mL IPTG 1mL -20℃,避光
试剂三 100mg/mL Amp 1mL -20℃,避光
注:
a. 本产品组分均为无菌规格,无需再进行除菌处理。
b. 在使用前,请瞬时离心各管小剂量试剂,以免损失。
产品特点
1. 本套装为即用型 Kit,无需客户再进行配制,可直接使用。灵活定制。
2. 灵活定制。客户可以根据自己的实验需求删减或添加其他所需的化合物,定制专属 Kit。也可以定制规格
和包装。
3. 库存充足,现货发送,性价比高。
使用说明(仅供参考)
直接加入培养基中使用(以 100mL 的含琼脂培养基为例)
1. 高压灭菌培养基,在超净台中冷却至 55℃左右(即:培养基摸着略烫手但未凝固)。
2. 在还未凝固的的培养基中,快速加入 500μL 的 试剂一、250μL 的试剂二和 100μL 的 试剂三,充分混
匀。
3. 倒平板,制作成含 X-Gal、IPTG 和 抗生素 的平板培养基。
注:a.不可以先加入 X-gal、IPTG 和 抗生素后,再去高压灭菌。
直接加入平板上使用(以 90mM 的平板为例)
1. 高压灭菌含琼脂的培养基,在超净台中倒平板。
2. 待平板充分凝固后,在平板上加入 40μL 试剂一、16μL 试剂二、10μL 试剂三,充分涂布。
3. 待涂布的液体干后即可使用。
注:具体涂布用量可根据实验结果进行调整。
蓝白斑筛选
1. 细菌铺板后,37℃培养倒置平板过夜,可根据长出菌落的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体。
2. 过夜培养后,若显色不明显,可在 4℃冰箱中放置 1-2 h。一段时间后蓝白斑显示会比较明显,便于挑选。
注意事项
1. X-Gal、IPTG 和 抗生素均对温度敏感,高温会使其快速失活。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
3. 请勿存放于普通住宅区。
4. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
常见问题
没有蓝斑
1. 载体处理的好,实验很成功,全是阳性克隆。
2. 使用的培养基含有乳糖或葡萄糖,因为半乳糖苷酶会分解乳糖,导致不能与 X-gal 反应,而葡萄糖不会
诱导融合基因的表达。
没有白斑
1. 外源目的基因没连接上,可能有外源目的基因的问题,如片段过大,或者是载体的问题。
2. 实验操作过程中抑菌做得不好,都是杂菌。
3. 插入的外源目的基因片段较短,且插入后的基因读码框恰好和 lacZ 基因相吻合。
无菌落生长
1. 感受态细胞状态不好,或操作过程中过于粗暴。
2. IPTG 使用浓度太高,IPTG 对菌体是有毒性的。
3. 抗生素使用浓度过高
注意事项
Considerations
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
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文献和实验反应才会发生;而且只有那些识别位点完全恢复的分子才能被重切。切割后正常的带型说明3′ 和 5′末端都是完整的,而且准备的酶样品中检测不到核酸外切酶和磷酸酶。采用PstI的一个例子显示如下: 蓝白斑筛选鉴定 用于克隆的酶还须通过额外的质量鉴定――蓝白斑筛选鉴定,以确定经酶过量消化后DNA末端的完整性。该种鉴定方法为:用酶10倍过量消化适当的载体上lacZ基因中单一的酶切位点,连接,转化,并涂XGal/IPTG/Amp平板。成功地切割、连接
相关专题 一、简介 X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色,因此常用于转基因筛选试验中,如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。 分子 式为C14H15BrClNO6,分子量为408.63,CAS Number 7240-90-6。 X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈蓝色。基于这个特点,pUC
摘要: 可以在蛋白质水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子。可以在 蛋白质 水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子.基因水平的鉴定有酶切鉴定、 PCR 鉴定、核酸杂交和基因序列分析等.蛋白质水平鉴定有插入失活双 抗生素 对照筛选(例如 Tet r 和 Amp r )和插入失活 LacZ' 基因的蓝白斑筛选等.表达载体可进行插入方向鉴定和表达产物的免疫学和生物学活性鉴定.一般重组








