- ￥999
- 碧云天（beyotime）
- 国产
- L06185
- 2025年07月23日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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零下20℃
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至少一年有效
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现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
5µg
pLenti-KMT5C-sgRNA (KMT5C基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得，sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的KMT5C基因敲除的质粒(L06185 pLenti-KMT5C-sgRNA)、慢病毒(L06186 KMT5C Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L06187 KMT5C Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L06188 KMT5C Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L06189 KMT5C Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
KMT5C基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | KMT5C | 84787 | BC005842 | NM_032701 |
| About the gene | |
| Official Symbol | KMT5C |
| Previous Symbol | SUV420H2 |
| Official Full Name | lysine methyltransferase 5C |
| Synonyms | MGC2705 |
| Location | 19q13.42 |
| Gene Type | protein_coding |
| Uniprot ID | Q86Y97 |
| Pathway/Library | Epigenetic Regulators Related Genes Library |
| Gene Summary | SUV420H2 and the related enzyme SUV420H1 (MIM 610881) function as histone methyltransferases that specifically trimethylate nucleosomal histone H4 (see MIM 602822) on lysine-20 (K20) (Schotta et al., 2004). |
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文献和实验又现抑癌基因调控代谢！复旦潘东宁团队 PNAS 报道甲基转移酶通过p53调控脂肪产热
细胞。KMT5c 为体外棕色脂肪细胞产热基因表达所必需。腹腔注射 β3 - 肾上腺素受体激动剂 Cl316,243 后，棕色和白色脂肪中 KMT5c 蛋白水平显著增加。KMT5c 参与 β3 - 肾上腺素信号级联反应诱导的脂肪细胞棕色化过程，驱动的脂肪细胞产热。图片来源：PNAS 2. Kmt5c 通过调控 Ucp1 表达控制白色脂肪棕色化。 在从 Kmt5c 基因敲除小鼠分离得到的米色脂肪组织 SVF 细胞中，Kmt5c 表达降低导致脂肪细胞基因表达下降。通过将 Kmt5cflox /flox 小鼠
进行标准化，预估扩增靶点的相对表达水平[1,2]。如今，终点 PCR 已基本被实时 PCR 或 qPCR 取代了，因为它们可获得更可靠和更准确的基因表达定量结果。 图 2：起始 cDNA 连续稀释液的 PCR 得率，通过在琼脂糖凝胶上对 PCR 产物染色进行可视化观察。 2.基因分型 PCR 可用于检测特定细胞或生物体中等位基因的序列差异。例如，基因敲除和敲入小鼠等转基因生物的基因分型[3]。引物对经设计位于目标区域侧翼，可根据是否存在扩增子及扩增子长度来检测遗传变异（图 3）。 图 3.PCR 用于
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充：设计 sgRNA 之后，需要对结果进行判断：但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选，我也不知道为什么，总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
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