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- 碧云天（beyotime）
- 国产
- L05830
- 2025年07月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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零下20℃
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至少一年有效
- 库存：
现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
5µg
pLenti-H4C6-sgRNA (H4C6基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得，sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的H4C6基因敲除的质粒(L05830 pLenti-H4C6-sgRNA)、慢病毒(L05831 H4C6 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L05832 H4C6 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L05833 H4C6 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L05834 H4C6 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
H4C6基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | H4C6 | 8361 | BC069288 | NM_003540 |
| About the gene | |
| Official Symbol | H4C6 |
| Previous Symbol | H4FC |
| Official Full Name | histone cluster 1 H4 family member f |
| Synonyms | H4/c; H4 |
| Location | 6p22.2 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | P62805 |
| Pathway/Library | Epigenetic Regulators Related Genes Library |
| Gene Summary | Histones are basic nuclear proteins that are responsible for the nucleosome structure of the chromosomal fiber in eukaryotes. Two molecules of each of the four core histones (H2A, H2B, H3, and H4) form an octamer, around which approximately 146 bp of DNA is wrapped in repeating units, called nucleosomes. The linker histone, H1, interacts with linker DNA between nucleosomes and functions in the compaction of chromatin into higher order structures. This gene is intronless and encodes a replication-dependent histone that is a member of the histone H4 family. Transcripts from this gene lack polyA tails but instead contain a palindromic termination element. This gene is found in the large histone gene cluster on chromosome 6. |
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文献和实验设计了 sgRNA 之后怎么办呢？还是这篇文章先讲一下这里的框架首先是实验设计Experimental design1. Target selection for sgRNA--选择靶点详情见：CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计 https://www.jianshu.com/p/ 8222f449cb442. Approaches for sgRNA construction and delivery.sgRNA 的合成和投递有两种方式：A）PCR；B）单独的 sgRNA
于 RACK1。 图 4 EST12 通过 RACK1 诱导 NLRP3 炎症小体的激活 A：qPCR 分析 EST12 蛋白处理的小鼠腹腔巨噬细胞 8 个 PYRIN 结构域蛋白的 mRNA 表达水平；B-C：WB 和共聚焦显微镜检测 EST12 蛋白刺激的 RAW264.7 细胞；D：qPCR 分析 EST12 处理 WT 和 RACK1−/−腹腔巨噬细胞的 NLRP3 mRNA 表达水平；E：IP 和 WB 分析质粒转染后 EST12 刺激的 RAW264.7 细胞；F：WB 分析裂解
颗粒都明显减少.设计的核酶构建了带有5’-、3’-自身修剪的真核细胞核酶表达质粒，包括含单个核酶和多个***的鸟枪型核酶基因的质粒，通过转染把他们同带有HBV基因组的质粒转入HepG2细胞. 用Southern blot、ELISA、RNase保护法等测定结果后，显示HBsAg、HBcAg、HBeAg以及他们相应的RNA、Dane颗粒数都因为核酶的作用而明显地减少[16]. Puthtz et al学者用重组筛选的方法从一个发夹型核酶文库中(5×109个)确定能有效地在转基因人肝癌细胞(HCC)中
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