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1-3年
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999
- 供应商:
亦高生物
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P1644-100ML

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文献和实验10分钟。将会看到血液分为2层,上层是淡黄色的血浆,约占60%。2、用巴士滴管或吸管将上层血浆吸出,还剩约1ml血细胞层,在血细胞层中加入1:1体积,即约1ml的灭菌生理盐水,混匀,见图2。 图2 在血细胞中加入生理盐水充分混匀 3、以下是把12ml生理盐水与血细胞混合物(相当于12ml全血)合并成一管后分离白细胞过程。将24 mL淋巴细胞分离液(是全血体积的2倍)预先加入灭菌的50 mL 离心管中。将与生理盐水混合的血细胞缓慢加入淋巴细胞分离液液面上,注意尽量不要让血细胞层掺入到淋巴细胞分离
开来。 2 方法 1) 无菌条件下抽取骨髓于含抗凝剂的采血管内,将骨髓与生理盐水或PBS溶液按等比例混匀,备用。 2) 按照稀释骨髓:细胞分离液比例为3:2的比例,缓慢将稀释骨髓液加入到细胞分离液上层,需保持液面分界清晰。 3) 800g,室温,离心 20min-30min(注:设置较慢的加速度和减速度,如果有十档,设为第三档)。 4) 小心吸取骨髓单个核细胞层(即白膜层)并转移至15mL离心管中。离心结束后,管内液面从上至下依次为无细胞骨髓液层、骨髓单个核细胞层、分离液层和红细胞
小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血,加入 1 Test 对应流式抗体,混匀,4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞,用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项: 采血用抗凝管,有肝素和 EDTA 两种,若直接裂解
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