镁基体改进剂，Sigma63043-50ML-F

植物质膜蛋白的提取和溶解

部分时，即使用如十二烷基硫酸钠（SDS) 这种最高效率的去垢剂，可能在复性整合蛋白质方面效率也是低的。 以使用去污剂 [ 5 ] 、有机溶剂 [ 5~7 ] 或碱性处理膜 [ 5，8，9 ] 为基础的方法被用来分离镶嵌蛋白。其中，作为一种容易的且有效率的方法，碱性提取已得到了广泛普及，在不影响组分完整的情况下，有选择性地从膜上分离外在的蛋白质 [ 10 ] 。在本章中，描述了一个基于用碱性-尿素处理 PM 的方案，此方案能够复性疏水性非常强的蛋白质，如水通道蛋白 [ 11~13

【原创】尿嘧啶糖苷酶的表达与纯化

转化细胞。活化后，再取2mL培养液，转接到200 mL含卡那霉素的新鲜LB液体培养基，37℃、150 r／mim振荡培养3.5 h左右，至OD值=1.0时，加入表达诱导剂 (IPTG)，至终浓度1．0mmol／L，继续在37℃ ,150 r／min条件下振荡培养，诱导表达，诱导3小时后收集菌体。 （2）10000g/4℃/5min收集菌体，用50ml缓冲液A（20mM Tris-HCL,0.2MNaCl,PH8.0）洗涤，10000g/4℃/3min，20ml缓冲液A重悬，4mg/ml终浓度溶菌酶4℃处理

双向凝胶荧光染色与成像

氨酸、甲硫氨酸或赖氨酸残基的亲核基团上 [6] 。由于涉及复杂的化学过程，目前有许多改进的方案，这些方法可降低背景和增加灵敏度 [ 8~10]。近年来，新的技术更关注如何改进银染方法和质谱技术的兼容性 [ 11~16] 。由于银离子对蛋白具有氧化作用和影响凝胶感化剂预处理 [6]，造成对氨基酸不可逆修饰从而影响了肽质指纹图谱分析或其他的质谱分析。大多数的改进方法包括去掉交联剂和增敏剂如戊二醛、甲醛 [5，11，14~16] ，以及改进酶消化前的脱色方法 [13] 。本章描述了一种酸性方法，它具有较好