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999
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亦高生物
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25535-16-4
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P4864-10ML

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文献和实验碘化丙啶染色1.原理 碘化丙啶(propidium iodide,PI)不能穿人完整的活细胞膜中,即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染,而坏死细胞由于失去膜的完整性,PI可进入细胞内与DNA结合,根据此特点,使用PI染色可鉴别死细胞。如果对活细胞染色必须在染色前进行固定,以增加细胞膜对染料的通透性。2.溶液配制 使用0.01mol/LPBS(pH 7.4)配制终浓度为0.5mg/ml的PI工作液。3.染色程序(1)单层细胞培养标本经预冷70%乙醇固定1小时,4℃;(2)0.01
组织中的细胞周期和凋亡检测方法之一--PI法schoman无论是肿瘤或其它正常新鲜组织均可用PI(碘化丙啶)的方法来检测,这是一种常见而且便宜的方法。主要操作步骤如下:1、组织块用0.25%胰酶消化30min-1h。2、200-400目筛网过滤细胞,获得单细胞悬液。3、75%乙醇(-20度预冷)固定细胞1h。4、加入PI(终浓度50ug/ml)和无DNA酶污染的RNA酶(终浓度50ug/ml)1ml染色30min-1h。5、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。注意事项: 1、组织消化后使细胞
FACS用于研究细胞组分DNA,碘化丙啶(PI)嵌入核酸双链中并可以发荧光。它不能进入活细胞,但是可以进入正在或者已经死亡的细胞。因此PI可以用于免疫荧光染色来鉴定死细胞。DNA染色可以用于研究细胞周期。相对的DNA含量可以坚持G1,G2和S期细胞的比例。在DNA染色中凋亡的细胞有特有的颜色。一、材料和试剂 1. TritonX-100(SigmaCatalogNo.T9284)2. 碘化丙啶(SigmaCatalogNo.P-4170)3. 乙醇 4. RNaseA
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