异硫氰酸荧光素-葡聚糖，SigmaFD40-100MG

荧光素FITC标记抗体的方法

min。②荧光素的准备 根据欲标记的蛋白质总量，按每毫克免疫球蛋白加0．01mg荧光色素，用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末。也可用下述公式计算出免疫球蛋白、荧光素的量，还可以算出需加缓冲液的量。a．蛋白溶液：含量Amg／m1；容积Bml。b．总蛋白量(AXB)＝Crag。c．C／20～C／10＝Dmg(如蛋白含量低于20mg／ml，用C／10；如高于20mg／ml，用C／20)。d．荧光素FITC的量：(1／50～2／100)XC＝Emg。e．巳0．5mol／L(pH9．5)碳酸盐缓冲

免疫荧光组织（细胞）化学技术系列四：荧光素及其标记抗体的方法

标记抗体的方法1、FITC标记抗体的方法（1）Marsshall氏法材料：抗体溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶(25-50ml) 、冰及冰槽（或1000ml烧杯）、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻棒、棉线及烧杯（500ml）、pH7.2的0.01mol/L PBS葡聚糖凝胶G-25层析柱等。方法及步骤：①抗体的准备：取适量已知抗体浓度之溶液，加入三角烧瓶中，再加入生理盐水及碳酸盐缓冲液，使最后抗体浓度为20mg/ml，碳酸

荧光标记抗体的制备方法

的-SO3Na基变为-SO3Cl基后，才能在碱性条件下与赖氨酸的氨基结合，形成稳定的硫氨键。 三、标记方法 异硫氰酸荧光素常用的标记法有以下两种： 1. 搅拌法 (1)取一定量的纯IgG液，用0.5 Mol/L pH9.5碳酸盐缓冲液稀释至20 mg/ml。 (2)按荧光素与蛋白质比1︰20～1︰100(一般用1︰100)称取异硫氰酸荧光素，用pH9.5碳酸盐缓冲液溶解。 (3)将球蛋白液置于电磁搅拌器上，启动开关，轻轻