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- 文献和实验
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- 保存条件:
-20°C-20°C
- 保质期:
1-3年
- 库存:
999
- 供应商:
亦高生物
- CAS号:
37067-30-4
- 规格:
M2133-100MG

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文献和实验-CI (pH 6 .8 )50 mmol / L DTT2 % SDS (电泳级)0.1 % 溴酚蓝10 % 甘油2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化材料1 )酶溶法(1)裂解缓冲液:50 mmol / L Tris-CI (pH 8 .0 )1 mmol / L EDTA100 mmol / LNaCI(2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF )。(3)10 mg / ml 溶菌酶。(4)脱氧胆酸。(5)1 mg / ml DNase I。2 )超声破碎法(1 )TE 缓冲
,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 ) 1 mmol / L EDTA 100 mmol / LNaCI (2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF )。 (3)10 mg / mL 溶菌酶。 (4)脱氧胆酸。 (5)1 mg / mL DNase I。 2 )超声破碎法 ( 1 ) TE 缓冲液。 ( 2 ) 2×SDS -PAGE 凝胶电泳加样缓冲液: 100 mmol / L Tris-HCI
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