厄尔平衡盐，SigmaE2888-100ML

细胞分离技术

液。重复清洗2到3次。 ●将盛有组织碎片的容器置于冰上，去除残留的上清液。加入0.25%溶解在无钙镁的平衡盐溶液中的胰蛋白酶（100 mg组织加入1ml 胰蛋白酶）。 ●在4℃孵育6到18小时，使几乎没有胰蛋白酶活性的酶尽可能渗透进去。 ●移弃组织碎片中的胰蛋白酶，在37℃孵育包含残留胰蛋白酶的组织碎片20到30分钟。 ●在组织碎片加入热的完全培养基，用移液管轻轻地分散组织。如果使用无血清培养基，要加入大豆胰蛋白酶抑制剂。 ●通过无菌不锈钢丝网（100～200 mm）过滤，分散

正常人表皮朗格汉斯细胞的培养

： 1．用外科手术刀将皮下脂肪除去，并将皮肤切成一定大小的皮片（不超过100cm2 ）。浸入20ml的D-Hanks平衡盐溶液中30min； 2．在软木板上覆盖消毒纱布，并用大头针将皮片固定其上。注意将皮片绷紧十分有利于皮片的制备； 3．抹干皮肤上液体，用备皮刀片取皮片。皮片厚大约0.15mm左右，由表皮和乳头层组成，可根据需要调节片皮的刀片角度以制备出合格的皮片； 4．将皮片的真皮层朝下放入预冷的胰蛋白酶溶液中，于37℃下作用1h，或在4℃下过夜； 5. 向上述被消化的皮

正常动物胸腺上皮细胞的培养

实验材料： 1. 胸腺上皮细胞来源；一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 有血清培养液：可使用RPMI1640培养液，添加10%胎牛血清、谷氨酰胺2mmol/L、丙酮酸钠1mmol/L、非必需氨基酸1mmol/L、2-巯基乙醇（2-ME）5×10-5 mol/L、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml