- ￥157
- Sigma
- USA
- MR-107-D
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C-20°C
- 保质期：
1-3年
- 库存：
999
- 供应商：
亦高生物
- 规格：
MR-107-D
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文献和实验的 PBS)离心洗涤 1~2 次； 若悬液中有明显的沉淀块，需用 200~300 目的滤网过滤后再用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)洗涤 1~2 次； 用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)调整浓度至 1x107/mL 备用。 六、贴壁细胞的制备 吸除培养基上清液，用含无钙、镁离子的PBS漂洗一次； 以 25 mL 培养基为例，加入 1 mL 消化液（0.1%胰蛋白酶），置室温（25℃）或 37℃ 消化 2~5 min；或者加入 1 mL 的 EDTA
体染色步骤中去除游离染料的第 4、5 步必不可少，以避免游离染料对后期实验的干扰。这一步相当于重新提取外泌体，所有外泌体提取纯化方式都适用。 c、去除游离染料的方法推荐选择 3~10KD 的超滤管，利用其置换溶剂功能去除游离染料。具体步骤和实验参数请咨询超滤管厂商。 d、染料标记外泌体与细胞共孵育的培养条件尽可能使用无血清培养基，以提高细胞对染料标记外泌体的摄取效率，共孵育参考时长为 2 小时。 e、本染料也可用于细胞膜染色，参考剂量染料浓度为 2X10–6 M，细胞浓度为 1X107 cells
[动物细胞] 从对数生长期细胞中提取的RNA 和DNA 质量好、得率高，所以细胞密度不宜超过85%，最好在提取前一天更换培养基。但有的基因在特定的生长状态或激活状态下达到最适表达，故实验所需的细胞状态还需根据具体实验目的而定。 A.悬浮培养的动物细胞或新鲜分离的动物组织单细胞悬液从脾脏、淋巴结和胸腺等富含RNA 酶的组织中提取RNA 和DNA 时，宜用温和的方法将之分离成单细胞悬液。 （1）取1×107细胞，4℃，1200×g 离心5min，弃尽上清。 （2）加0.45ml 4℃预冷
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