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-20°C-20°C
- 保质期:
1-3年
- 库存:
999
- 供应商:
亦高生物
- 规格:
S5893-1000EA

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文献和实验PBS缓冲液冲洗细胞。轻轻摇动培养皿。吸出Hass缓冲液。 3) 添加1毫升0.05%胰蛋白酶EDTA至100毫米培养皿与293T细胞融合。在37°C为1分。轻轻摇动培养皿。您会看到细胞脱离培养皿。加入9毫升介质和轻轻用吸管向上和向下吹打以让细胞从板上脱离。分离后,倒入50 ml锥形管。 4) 在1000 RPM离心细胞为3-4分钟。用真空的巴斯德吸管取出上清液。添加10毫升培养基和轻轻用吸管向上和向下吹打重新悬浮
6.10分钟后,把三角烧瓶取下,磁力搅拌器关上,用一个吸管轻轻吹打(使消化下来的细胞彻底从组织团快上掉下来),这个吸管(1)用后固定放在一个离心管中,以后每次消化后取下都用其吹打几下,第一次上清弃去,然后向两个1号管分别倒入2ml上清(尽量不要把组织倒出,也不要剩液太多,以免消化下的细胞重复消化造成损伤),用另一个吸管(2)混匀配平两个管(即两个管水平高度相同),轻轻吹打,以免损坏细胞。 7.接着把这两个离心管放入离心机中,调10分钟,800或1000转,打开关。 8.同时向三角烧瓶中
,留取沉淀物。加入0.25mol/L蔗糖与0.003mol/L氯化钙液lml,用吸管吹打成悬液,以17000rpm离心20分钟,将上清吸入另一试管中,留取沉淀物,加入0.1ml 0.25mol/L蔗糖与0.003mol/L氯化钙溶液混匀成悬液,即得线粒体。 (3)液闪仪我没有用过,不过我觉得提取的线粒体数目应该足够你做(每个心肌细胞中都有>1000个的线粒体)。具体的上样标准我觉得需要查你使用的液闪仪的说明书。 8、问:盐酸乙醇该怎么配置呢? 答:0.5%的溶液应为重量百分比,即100
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