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999
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亦高生物
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08-115

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文献和实验溶液可以高压(不怕变性,有可溶的和不可溶的,可用sigma的,不贵。另外,二者均可高压后使用,我都试过),用PBS配。浓度在0.5-2%均可。将3-5ml明胶PBS放在培养瓶中,培养箱中包被1h以上,能过夜是最好的。用前取出,吸弃明胶,加入1-2ml培养液(10%血清即可)冲洗,稍微吹干即可使用,培养效果甚佳。 抱歉,这是我师兄做了3年实验和我养3年细胞的经验,书上并无详细说明。具体原理可以参考《细胞实验指南》(冷泉港实验室),明胶的主要成分是I型胶原,铺胶包被后,可以促进细胞增殖、迁移,而且价格便宜
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细胞的研究中被普遍采用。 ㈠ 原理 在体外,内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖,并可传代,可作为内皮细胞增殖,细胞因子分泌、表型等研究的模型。 ㈡ 方法 1. 脐带内皮细胞的分离 试剂与器材 (1)胶原酶(Sigma):I型((C-0130),用无血清RPMI 1640配成0.1%(W/V),分装、-20℃保存。 0.1%明胶:称取明胶,用三蒸水配成0.2%(W/V)溶液,37℃水浴溶解,过滤,放4℃备用。(即用过滤法消毒) (2)Cord Buffor 肝星状
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