- ￥1290 - 3960
- 帛科
- BK-DB7685
- 国产
- 2026年01月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
21
- 英文名：
Recombinant Human ADAM10 protein
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
-20 to -80 °C
- 规格：
50μg、100ug 、1mg
商品介绍：
内毒素: Please contact with the lab for this information.
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human ADAM10 (Thr214-Ser504) was fused with His tag
制剂: Lyophilized.Lyophilized from PBS pH7.4,0.02%NLS,1mM EDTA, 4%trehalose,1% mannitol.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.
分子别名: Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10,ADAM 10,CDw156,Kuzbanian protein homolog,Mammalian disintegrin-metalloprotease,CD156c,KUZ,MADM
背景介绍: Cleaves the membrane-bound precursor of TNF-alpha at '76-Ala-|-Val-77' to its mature soluble form. Responsible for the proteolytical release of soluble JAM3 from endothelial cells surface.Responsible for the proteolytic release of several other cell-surface proteins, including heparin-binding epidermal growth-like factor, ephrin-A2, CD44, CDH2 and for constitutive and regulated alpha-secretase cleavage of amyloid precursor protein (APP).Contributes to the normal cleavage of the cellular prion protein.Involved in the cleavage of the adhesion molecule L1 at the cell surface and in released membrane vesicles, suggesting a vesicle-based protease activity.Controls also the proteolytic processing of Notch and mediates lateral inhibition during neurogenesis.Responsible for the FasL ectodomain shedding and for the generation of the remnant ADAM10-processed FasL (FasL APL) transmembrane form.Also cleaves the ectodomain of the integral membrane proteins CORIN and ITM2B.Mediates the proteolytic cleavage of LAG3, leading to release the secreted form of LAG3.Enhances the cleavage of CHL1 by BACE1.Cleaves NRCAM.Cleaves TREM2,resulting in shedding of the TREM2 ectodomain.Involved in the development and maturation of glomerular and coronary vasculature.During development of the cochlear organ of Corti, promotes pillar cell separation by forming a ternary complex with CADH1 and EPHA4 and cleaving CADH1 at adherens junctions.May regulate the EFNA5-EPHA3 signaling.
重组蛋白质的可溶性鉴定：
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
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| 货号 | BK-DB7685 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 纯度 | >90% as determined by SDS-PAGE | 预测分子量 | 34.63 kDa |
| 表达宿主 | E.coli | 种属 | Homo sapiens (Human) |
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human ADAM10 (Thr214-Ser504) was fused with His tag
制剂: Lyophilized.Lyophilized from PBS pH7.4,0.02%NLS,1mM EDTA, 4%trehalose,1% mannitol.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.
分子别名: Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10,ADAM 10,CDw156,Kuzbanian protein homolog,Mammalian disintegrin-metalloprotease,CD156c,KUZ,MADM
背景介绍: Cleaves the membrane-bound precursor of TNF-alpha at '76-Ala-|-Val-77' to its mature soluble form. Responsible for the proteolytical release of soluble JAM3 from endothelial cells surface.Responsible for the proteolytic release of several other cell-surface proteins, including heparin-binding epidermal growth-like factor, ephrin-A2, CD44, CDH2 and for constitutive and regulated alpha-secretase cleavage of amyloid precursor protein (APP).Contributes to the normal cleavage of the cellular prion protein.Involved in the cleavage of the adhesion molecule L1 at the cell surface and in released membrane vesicles, suggesting a vesicle-based protease activity.Controls also the proteolytic processing of Notch and mediates lateral inhibition during neurogenesis.Responsible for the FasL ectodomain shedding and for the generation of the remnant ADAM10-processed FasL (FasL APL) transmembrane form.Also cleaves the ectodomain of the integral membrane proteins CORIN and ITM2B.Mediates the proteolytic cleavage of LAG3, leading to release the secreted form of LAG3.Enhances the cleavage of CHL1 by BACE1.Cleaves NRCAM.Cleaves TREM2,resulting in shedding of the TREM2 ectodomain.Involved in the development and maturation of glomerular and coronary vasculature.During development of the cochlear organ of Corti, promotes pillar cell separation by forming a ternary complex with CADH1 and EPHA4 and cleaving CADH1 at adherens junctions.May regulate the EFNA5-EPHA3 signaling.
重组蛋白质的可溶性鉴定：
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品：
| DNA损伤诱导蛋白1封闭多肽 | 间隙连接蛋白30.3抗体 |
| DPH4蛋白封闭多肽 | Anti-ODC/PE |
| DNA甲基转移酶-3α封闭多肽 | Anti-phospho-TOB (Ser164)/PE |
| EHD4蛋白封闭多肽 | Anti-PCDHA2/PE |
| E选择素封闭多肽 | Anti-DIP13B/PE |
| 信号通路Wnt1抗体 | Anti-PIBF/PE |
| 1号染色体开放阅读框201抗体 | Anti-GPR3/PE |
| 跨膜蛋白SEMA3D封闭多肽 | Anti-XRCC4/PE |
| 微管相关蛋白2单克隆抗体 | Anti-FREM2/PE |
| 转录调节因子C/EBPε抗体 | Anti-5HT3C/PE |
| FCN1蛋白封闭多肽 | Anti-VGLL4/PE |
| 类固醇硫酸酯酶抗体 | Anti-SERF1/PE |
| SHFM3蛋白抗体 | Recombinant Human ADAM10 protein孤儿核受体蛋白Nur77抗体 |
| 防御素β2抗体 | 酸脱氢酶复合物X蛋白抗体 |
| DOCK10蛋白封闭多肽 | 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ATR抗体 |
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