Recombinant Human AIF1/IBA1 protein

Recombinant Human AIF1/IBA1 pr

otein
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  • ¥1290 - 3960
  • 帛科
  • BK-DB7641
  • 国产
  • 2025年07月12日
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      47

    • 英文名

      Recombinant Human AIF1/IBA1 protein

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      上海帛科

    • 保存条件

      -20 to -80 °C

    • 规格

      50μg、100ug 、1mg

    商品介绍:
    货号 BK-DB7641 用途 仅供科研研究实验
    纯度 >90% as determined by SDS-PAGE 预测分子量 18.07 kDa
    表达宿主 E.coli 种属 Homo sapiens (Human)
    内毒素: Please contact with the lab for this information.
    蛋白构建: A DNA sequence encoding the human AIF1/IBA1 (Met1-Pro147) was fused with His tag
    制剂: Supplied as solution form  in  PBS pH 7.5 or lyophilized  from PBS pH 7.5.
    运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
    稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
    复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
    分子别名: AIF-1 Protein, Human; IBA1 Protein, Human; IRT-1 Protein, Human; IRT1 Protein, Human
    背景介绍: AIF1, also known as IBA1, is an actin-binding protein. AIF1 is expressed selectively in human macrophage-like cell lines, and in a suset of CD68(+) macrophages in the interstitial and perivascular spaces of human heart allografts. It is expressed in macrophages and neutrophils. AIF1 enhances membrane ruffling and RAC activation. AIF1 enhances the actin-bundling activity of LCP1. It also enhances lymphocyte migration. AIF1 may play a role in macrophage activation and function. It binds calcium and plays a role in RAC signaling and in phagocytosis. It promotes the proliferation of vascular smooth muscle cells and of T-lymphocytes.
    重组蛋白质的可溶性鉴定:
    1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中,然后在-80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
    2. 冰中解冻。
    3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次, 每次 10 sec,间歇 10 sec,电压 200-300 V。
    4. 10000g,4oC,离心 20min,取上清(为溶液 A), - 20 oC 保存; 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解(为溶液 B),同样 -20 oC 保存,供后继分析使用。
    5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳, 考马斯亮蓝染色, 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中, 则为可溶性蛋白;如果是在 B 溶液中,则为非可溶蛋白。

    Recombinant Human AIF1/IBA1 pr
    重组蛋白质的分离纯化:
    1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2(Lysis buffer under denaturing conditions )中,室温下搅拌和吹打沉淀,避免泡沫生成。
    2. 10000g ,4 oC,离心 30 min,收集上清液。
    3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子,并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统,用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose,调节 A280 值至零线。
    4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中, 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
    5. 分别用 5 ~ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2(Washbuffer 1 and 2)清洗柱 子,直至 A280 值低于 0.01。
    6. 用洗脱液(Elution buffer)洗脱重组蛋白质, 在 A280 值监测下,收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。

    Recombinant Human AIF1/IBA1 pr
    表达载体在基因工程有以下几种元件:
    (1)选择标志的编码序列;
    (2)可控转录的启动子;
    (3)转录调控序列(转录终止子,核糖体结合位点);
    (4)一个多限制酶切位点接头;
    (5)宿主体内自主复制的序列。

    Recombinant Human AIF1/IBA1 pr
    重组蛋白质的诱导表达:
    1. 挑取转化有质粒的单菌落, 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中, 37 oC,250 rpm/min 振摇培养过夜。
    2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml(1:20)选择性 LB 液体培养基 中, 37 oC,250 rpm/min 振摇培养至光密度(OD600=0.6)时,取 1 ml 样本作 为诱导前标本, 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀,-20 oC 冻存备用。
    3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中,使 IPTG 终浓度为 1 mM ,37 oC ,250 rpm/min 振摇培养 4 ~ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本,同上法收集菌体沉淀, -20 oC 冻存备用。
    4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS(pH= 8.0)重悬, 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液, 煮沸加热 5min,SDS 聚凝胶(SDS-PAGE)电泳分离 , 考马斯亮蓝染色 3 小时后,脱色观察结果。
    5. 选取诱导成功的细菌克隆,扩大诱导规模,收集菌体沉淀,于- 20 oC 保存,准备做下一步分析及纯化。
    公司出售的相关产品:
    Cy3标记的兔抗狗IgG H&L 金属蛋白酶组织抑制因子-2抗体
    Cy5.5标记的兔抗小鼠k链 Anti-alpha Tubulin (Acetyl Lys40)/AF488
    C-K封闭多肽 Anti-lysozyme/AF488
    DH 5 alpha 大肠杆体蛋白 Anti-Cytokeratin 13/AF488
    DNA拓扑异构酶2-β/TOP2B封闭多肽 Anti-Host cell factor C2/AF488
    鸭沙门氏抗体 Anti-SNTB2/Syntrophin-3/AF488
    睾丸凋亡基因抗体 Anti-GLEPP1/AF488
    17β羟类固醇脱氢酶7抗体 Anti-Phospho-HER2 (Tyr1139)/AF488
    粘蛋白-5B抗体 Anti-SLC39A10/AF488
    双氧化酶1/甲状腺氧化酶1抗体 Anti-BTBD10/AF488
    真核翻译起始因子3亚基L/eIF3e蛋白抗体 Anti-LRP1/AF488
    松弛肽/松弛素抗体 Anti-beta Crystallin A3/AF488
    细胞外基质蛋白1抗体 Recombinant Human AIF1/IBA1 protein鸡新城疫疫苗(鸡瘟4型混合病毒)抗体
    膀胱癌缺失基因1抗体 自噬相关蛋白10抗体
    Cy3标记的兔抗鸡IgM 酪氨酸蛋白激酶受体A1抗体

     

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