- ￥1290 - 3960
- 帛科
- BK-DB7435
- 国产
- 2025年07月15日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
51
- 英文名：
Recombinant human Amyloid beta（aa1-42) protein
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
-20 to -80 °C
| 货号 | BK-DB7435 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 纯度 | >95% | 预测分子量 | |
| 表达宿主 | E.coli | 种属 | Homo sapiens (Human) |
背景介绍: Amyloid Precursor Protein (APP) is a type I transmembrane protein that is ubiquitously expressed on cell surfaces. It undergoes complex proteolytic processing and is cleaved by alpha-, beta-, and gamma-Secretases to generate soluble APP alpha, soluble APP beta, and Amyloid beta (A beta) fragments of several lengths. One of these fragments, A beta 42, generated by beta- and gamma-Secretase activities, has been implicated in Alzheimer's disease. Aberrantly high levels of this peptide form and accumulate in the brains of Alzheimer's disease patients to create the senile plaques characteristic of the disease.
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品：
| 20号染色体开放阅读框144封闭多肽 | 上皮细胞膜蛋白3封闭多肽 |
| 20号染色体开放阅读框103封闭多肽 | Anti-PP2A alpha + beta/Biotin |
| 1型前胶原氨基末端前肽/I型前胶原氨基末端前肽封闭多肽封闭多肽 | Anti-GTPBP4/Biotin |
| 1号染色体开放阅读框31封闭多肽 | Anti-RGMC/Repulsive Guidance Molecule C/Biotin |
| 7号染色体开放阅读框16封闭多肽 | Anti-OGG1/Biotin |
| 转录因子OTX1封闭多肽 | Anti-phospho-ITGB3 (Tyr785)/Biotin |
| 角质形成细胞相关跨膜蛋白2封闭多肽 | Anti-CRYL1/Biotin |
| 肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP11抗体 | Anti-phospho-PDCD4 (Ser67)/Biotin |
| CULLIN抗体 | Anti-CCDC42/Biotin |
| 缺氧诱导基因1B蛋白封闭多肽 | Anti-GPATCH1/ECGP/Biotin |
| EMR3蛋白抗体 | Anti-DDX3Y/Biotin |
| 白三烯B4受体1封闭多肽 | Anti-LARP7/Biotin |
| 双同源盒蛋白A抗体 | Recombinant human Amyloid beta（aa1-42) proteinZDHHC6蛋白封闭多肽 |
| 富含丝氨酸RNA结合蛋白RNPS1封闭多肽 | 防御素β-113/β-defensin 113封闭多肽 |
| 1号染色体开放阅读框163封闭多肽 | 肠道分化干细胞MATH-1蛋白封闭多肽 |
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验Production and Functional Assays of Recombinant Secreted Amyloid Precursor Protein (APP) (sAPPα)
The β-amyloid precursor protein (APP) is connected to Alzheimer’s disease by both biochemistry and genetics. As the source of the major constituent of amyloid plaques, APP has been the subject of many studies of its expression and metabolism
Posttranslational Modifications of the Amyloid Precursor Protein: Glycosylation
Many studies have demonstrated the importance of amyloid precurser protein (APP) in the pathogenesis of Alzheimer’s disease. Nonetheless, the exact mechanism by which APP contributes to the pathogenesis of Alzheimer’s disease is still not clear
Methods for Producing Recombinant Human Cellular Retinaldehyde-Binding Protein
The cellular retinaldehyde-binding protein (CRALBP) is expressed at high levels in vertebrate visual trssue, where it may serve to modulate the interaction of 11-cis -retinol with visual-cycle enzymes in the retinal pigment epithelium (RPE
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
