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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
47
- 英文名:
9(Z),11(E),13(E)-Octadecatrienoic Acid methyl ester
- CAS号:
4175-47-7
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1mg 5mg 10mg
规格:1mg 5mg 10mg
CAS:4175-47-7
别名:N/A
化学名:N/A
9(Z),11(E),13(E)-Octadecatrienoic Acid methyl ester分子式:C19H32O2
分子量:292.5
溶解度:DMF: 30 mg/ml,DMSO: 30 mg/ml,Ethanol: 100 mg/ml
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
| 产品名称 | 9(Z),11(E),13(E)-Octadecatrienoic Acid methyl ester | 产品货号 | CS-01Y65074 |
| 规格 | 1mg 5mg 10mg | CAS号 | 4175-47-7 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C19H32O2 |
| 分子量 | 292.5 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
9Z,11E,13E-octadecatrienoic acid (α-ESA) is a conjugated polyunsaturated fatty acid commonly found in plant seed oil. This fatty acid accounts for about 60% of the total fatty acid composition of bitter gourd seed oil and about 70% in tung oil. α-ESA is metabolized and converted to conjugated linoleic acid (9Z,11E-CLA) in rats. It has shown potential as a tumor growth suppressor. In colon cancer Caco-2 cells, α-ESA induced apoptosis through up-regulation of GADD45, p53, and PPARγ. In DLD-1 cells supplemented with α-ESA, apoptosis was induced via lipid peroxidation with an EC50 of 20 μM. It also inhibits DNA polymerases and topoisomerases with IC50s ranging from ~5-20 μM for different isoforms of the enzymes. α-ESA methyl ester is a neutral, more lipid soluble form of the free acid.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| (S)-3-Isopropylamino-1,2-propanediol | Bromodiphenhydramine (hydrochloride) |
| Bromodomain IN-1 | CD209分子(CD209)ELISA试剂盒 |
| Bromodomain Inhibitor, (+)-JQ1 | CD19分子(CD19)ELISA试剂盒 |
| Bromodomain inhibitor-8 | CD147分子(CD147)ELISA试剂盒 |
| Bromoenol lactone | CD15分子(CD15)ELISA试剂盒 |
| Bromopride | CD146分子(CD146)ELISA试剂盒 |
| Bromosporine | CD134分子(CD134)ELISA试剂盒 |
| Bromperidol (R-11333) | CD117分子(CD117)ELISA试剂盒 |
| Brompheniramine hydrogen maleate | CD22分子(CD22)ELISA试剂盒 |
| Bronopol (BNPD) | CD30分子(CD30)ELISA试剂盒 |
| Broxaldine (Brobenzoxaldine) | CD34分子(CD34)ELISA试剂盒 |
| Broxyquinoline | CD3分子(CD3)ELISA试剂盒 |
| Bruceine A | 9(Z),11(E),13(E)-Octadecatrienoic Acid methyl esterCD40配(CD40L)ELISA试剂盒 |
| Polymyxin B nonapeptide TFA | CD44变6(CD44-v6)ELISA试剂盒 |
| 人血管内皮生长因子受2ELISA试剂盒 | CD44分子(CD44)ELISA试剂盒 |
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文献和实验E-Z 96® M13 Isolation Vacuum Manifold Protocol
the E-Z 96 DNA Plate back on the manifold and apply the vacuum for another 5 minutes. Repeat the tapping step from step 11 to completely remove any remaining liquid. 13. Optional: Place the E-Z® 96 DNA Plate into a vacuum oven preset at 60°C
E.Z.N.A. Cycle-Pure Kit Spin Protocol
实验试剂 1. Optional: Sterile deionized water 2. Absolute ethanol (~ 96-100%) 实验设备 1. Microcentrifuge capable of at least 13,000x g 2. Nuclease-free 1.5ml centrifuge tubes 实验
E. Z. N.A.TM X-press Plasmid Protocol
) into the Xpress spin column. 11. Centrifuge at maximum speed (13,000 x g) for 1 minute. 12. Discard the flow-through liquid and re-use the collection tube. 13. Place the empty X-press spin column back into the 2 ml collection tube. Centrifuge
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