- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y64551
- 国产
- 2026年01月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
31
- 英文名：
Cyclic AMP
- CAS号：
60-92-4
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
500mg 1g 5g
| 产品名称 | Cyclic AMP | 产品货号 | CS-01Y64551 |
| 规格 | 500mg 1g 5g | CAS号 | 60-92-4 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C10H12N5O6P |
| 分子量 | 329.21 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Cyclic adenosine 3', 5'-monophosphate (cAMP) was the first second messenger to be identified, with the IC50 of LPA- or EGF-stimulated ERK1 was 0.1-0.2 Mm [1].Ras is a common target for growth factors including epidermal growth factor (EGF) and lysophosphatidic acid (LPA), which activate the Raf-MEK-ERK pathway. Raf is likely to be a link between Ras and ERK cascade, of which Raf-1activates MEK in vitro.Quiescent Rat1 cells were incubated with 1 Mm dibutyryl cAMP for 10 min before stimulation with LPA or EGF, ERK activation was completely inhibited by protein immunoblots. The ability of the phorbol ester PMA to activate MAP kinase was also inhibited by dibutyryl cAMP [1].Reference:[1] Cook S J, McCormick F. Inhibition by cAMP of Ras-Dependent Activation of Raf [J]. Science. 1993, 262(5136):1069-1072.
化学性质:
规格：500mg 1g 5g
CAS：60-92-4
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C10H12N5O6P
分子量：329.21
溶解度：insoluble in DMSO; insoluble in EtOH; >16.45 mg/mL in H2O
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Cyclic AMP实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| ([ring-D₅]Phe⁶)-Somatostatin-14 | 15-acetoxy Scirpenol |
| 15-deoxy-Δ-12,14-Prostaglandin J2 | TRAb 人抗促甲状腺素受抗ELISA检测试剂盒 |
| 15-deoxy-δ12,14-Prostaglandin J2-d4 | ATGA/TGAB 人抗甲状腺球蛋白抗ELISA检测试剂盒 |
| 15-keto Latanoprost | ET-1 人内皮素1ELISA检测试剂盒 |
| 15-keto Latanoprost (free acid) | ATMA/TMAB 人抗甲状腺微粒抗ELISA检测试剂盒 |
| 15-keto Prostaglandin F1α | PGF 人前列腺素FELISA检测试剂盒 |
| 15-keto Prostaglandin F2α | ALD 人醛固酮ELISA检测试剂盒 |
| 15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α | FE3 人游离雌三醇ELISA检测试剂盒 |
| 15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide | PTH 人甲状旁腺激素ELISA检测试剂盒 |
| 15-methyl Palmitic Acid | PGD2-MOX 人甲肟前列腺素D2ELISA检测试剂盒 |
| 16(R)-HETE | GAD-Ab 人谷氨酸脱羧酶自身抗ELISA检测试剂盒 |
| 16(S)-HETE | TSHR 人促甲状腺激素受抗ELISA检测试剂盒 |
| 16,16-dimethyl Prostaglandin A1 | Cyclic AMPAZT 人叠氮胸苷ELISA检测试剂盒 |
| Nifuroxazide | Resistin 人抵抗素ELISA检测试剂盒 |
| 人谷氨酰胺酶2ELISA试剂盒 | PRL 人催乳素ELISA检测试剂盒 |
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文献和实验缩写为cAMP，又称环式 AMP。正式名称为 3′， 5′一磷酸环腺苷。是环核苷酸之一。 RNA在水解时，虽也能产生 2′， 3′型的中间产物。但通常根据生理上的重要性，仅将如图所示的 3′， 5′ -环型物称为 cAMP。它广泛存在于动植物组织和细菌中，一般浓度是极低的，为 10-6 — 10-7 M。是通过局部存在于膜构造上的腺苷酸环化酶的酶促作用，从 ATP合成。它是由 E． W． Sutherland， T． W． Rall（ 1957）作为肾上腺素，胰高血糖素的血糖上升作用
The Measurement of Cyclic AMP Levels in Biological Preparations
The generation of cyclic AMP (cAMP) is probably the most scrutinized of signal transduction pathways. Receptors may be linked to the generation of AMP by one of two routes. One group of receptors (such as β-adrenoceptors, A2 adenosine receptors
Cyclic AMP- Dependent Protein Kinase Activity Ratio Assay
A multitude of natural and pharmacological agents, including hormones, neurotransmitters, and phosphodiesterase inhibitors, raise intracellular cAMP levels and, in the vast majority of instances, the physiological effects are the result
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