- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y64666
- 国产
- 2026年03月27日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
27
- 英文名：
DDA
- CAS号：
25152-84-5
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
5mL 10mL 25mL 50mL
| 产品名称 | DDA | 产品货号 | CS-01Y64666 |
| 规格 | 5mL 10mL 25mL 50mL | CAS号 | 25152-84-5 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C10H16O |
| 分子量 | 152.2 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Lipoxygenase-catalyzed peroxidative decomposition of unsaturated fatty acids occurs within seconds when diatoms are crushed or eaten, producing alkyls. DDA is a prominent member of this class of reactive compounds. Common ω-6 fatty acids such as linoleic acid, dihomo-ω-linolenic acid, and arachidonic acid can give rise to DDA. DDA reduces the hatching rate and has a strong teratogenic effect on the eggs of pelagic copepods, at concentrations around 1 μM. In human carcinoma Caco2 cells, DDA induces cell growth arrest at around 15 μM. DDA appears to be a natural defensive chemical designed to limit the reproductive success of copepods, the main predators of diatoms. It may also be a more general inducer of apoptosis.
化学性质:
规格：5mL 10mL 25mL 50mL
CAS：25152-84-5
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C10H16O
分子量：152.2
溶解度：DMF: 10 mg/ml,DMSO: 10 mg/ml,Ethanol: 10 mg/ml,Ethanol:PBS (pH 7.2) (1:2): .15 mg/ml
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)DDA实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| ([¹³C₆]Leu⁶)-Endothelin-1 (human, bovine, dog, mouse, porcine, rat) | 10Z-Hymenialdisine |
| 11-(Boc-amino)-undecanoic acid | KIR 人杀伤细胞免疫球蛋白样受ELISA检测试剂盒 |
| 11(Z),14(Z)-Eicosadienoic Acid methyl ester | α-SCA 人α横纹肌肌动蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 11-cis Retinal | mIgM 人表面膜免疫球蛋白MELISA检测试剂盒 |
| 11-cis Retinol | HLE 人白细胞弹性蛋白酶ELISA检测试剂盒 |
| 11-Dehydrocorticosterone | histatin 5 人富组蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 11-deoxy Prostaglandin E1 | granulysin 人颗粒溶素ELISA检测试剂盒 |
| 11-deoxy Prostaglandin E2 | Attacin 人抗肽ELISA检测试剂盒 |
| 11-deoxy Prostaglandin F2α | ILTsR/LIR/CD85 人免疫球蛋白样转录受ELISA检测试剂盒 |
| 11-Deoxymogroside IIE | AOPP 人晚期氧化蛋白产物ELISA检测试剂盒 |
| 11-keto-β-Boswellic Acid | cytovillin/ezrin 人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 11-Oxomogroside IIa | CyPA 人嗜环蛋白/亲环素AELISA检测试剂盒 |
| 11β-Hydroxyetiocholanolone | DDAdystrophin 人肌养蛋白ELISA检测试剂盒 |
| Miconazole Nitrate | Collectin 人胶原凝集素ELISA检测试剂盒 |
| 人γ-谷氨酰基转氨酶5ELISA试剂盒 | TALLA-1/CD231 人T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原ELISA检测试剂盒 |
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文献和实验随着不同的基于质谱分析方法的发展，可以研究的蛋白互作网络的范围也在逐渐增加。更重要的是，用于肽和蛋白质定量的新兴方法产生的数据是完整且无偏差的，是研究完整网络或蛋白互作的基本要求。 基于数据依赖性采集（Data-dependent acquisition, DDA）易于执行，并能快速评估样本中的物质的数量。除了简单之外，还需要对蛋白质进行鉴定和翻译后修饰。任何蛋白质的生物学特性在动态系统中的已知程度都是极微小的，不断增加的拼接变异体，SNP等很可能意味着在可预见的未来，使用数据依赖性采集
高清晰数据直接分析：应用四极杆离子淌度飞行时间质谱进行非靶向蛋白质组学分析
序列标注以及更准确的鉴定结果。 随着硬件性能的改善，我们开发出一系列新型LC/MS采集方案和碎裂机制，包括母离子发现(PID)方法、非信息依赖型采集(DIA)、离子淌度(IM)辅助方法以及电子转移解离(ETD)。目前，IM主要应用于多种类型分析物的截面分析和结构 分析1 ，可增强DIA采集的特异性，例如HDMSE 。 本研究中展示了一种新型的高清晰数据采集 (HD-DDA)模式在蛋白质 和肽鉴定中的应用优势，该模式将离子淌度法结合到四极杆飞行时间质谱仪中。HD-DDA采用一种高
高分辨质谱使用较为常见的母离子选择的规则为 DDA 采集模式，即数据依赖性采集模式，采集规则通常为按照采集到的一级质谱（母离子）的信号强度排列，将 Top N 的一级质谱选择设置进行打碎，再采集其对应的二级质谱碎片，目前二级质谱是高分辨液相色谱质谱进行代谢物鉴定最常用的维度之一，下面给大家展示，标准品的二级质谱图以及样本中代谢物的二级质谱图与数据库匹配的情况： 图 6 | α-亚麻酸的标准品二级质谱图与公共数据库匹配情况 图 7 | 细胞样本中柠檬酸二级质谱图与公共数据库匹配情况
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