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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
44
- 英文名:
Cordycepin
- CAS号:
73-03-0
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
10mM (in 1mL DMSO) 20mg
| 产品名称 | Cordycepin | 产品货号 | CS-01Y64199 |
| 规格 | 10mM (in 1mL DMSO) 20mg | CAS号 | 73-03-0 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C10H13N5O3 |
| 分子量 | 251.24 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Cordycepin规格:10mM (in 1mL DMSO) 20mg
CAS:73-03-0
别名:
化学名:(2R,3R,5S)-2-(6-aminopurin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)oxolan-3-ol
分子式:C10H13N5O3
分子量:251.24
溶解度:≥ 10.3mg/mL in DMSO
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Cordycepin, which is a nucleoside derivative isolated from Cordyceps, inhibits IL-1β-induced MMP-1 and MMP-3 expression in rheumatoid arthritis synovial fibroblasts (RASFs) in a dose-dependent manner.Cordycepin is a potent inhibitor of IL-1β-induced chemokine production and MMP expression and strongly blocks the p38/JNK/AP-1 signalling pathway in RASFs. The effect of Cordycepin on cellular toxicity of RASFs is assessed using MTT assay. Treatment of RASFs with Cordycepin (50 μM or 100 μM) for 24 h does not cause any significant change in cell viability. However, cell viability is slightly decreased when cells are incubated with 100 μM Cordycepin for 48 h[1].References:[1]. Noh EM, et al. Cordycepin inhibits IL-1beta-induced MMP-1 and MMP-3 expression in rheumatoid arthritis synovial fibroblasts. Rheumatology (Oxford). 2009 Jan;48(1):45-8.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Fmoc-D-Tic-OH | (RS)-3,5-DHPG |
| (RS)-3-Amino-3-(3-pyridyl)-propionic acid | NHE3 人Na+/H+交换3ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-3-Hydroxyphenylglycine | SDH 人山梨醇脱氢酶ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-4-Carboxy-3-hydroxyphenylglycine | PDIA3 人蛋白二硫化物异构酶A3ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-4-Carboxyphenylglycine | lumican 人基膜聚糖ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-AMPA | PDI 人蛋白二硫化物异构酶前ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-AMPA hydrobromide | 2,3-DPG 人2,3-二磷酸甘油酸ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-AMPA monohydrate | C/EBPβ 人CCAAT增强子结合蛋白βELISA检测试剂盒 |
| (RS)-CPP | OFQ/N 人孤腓肽ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-MCPG | Elastase 人弹性蛋白酶ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-MCPG disodium salt | ALP 人碱性磷酸酶ELISA检测试剂盒 |
| (RS)-PPG | Angiotensinase 人血管紧张肽酶ELISA检测试剂盒 |
| (S)-(-)-5-Fluorowillardiine | CordycepinPAMY 人胰淀粉酶ELISA检测试剂盒 |
| Colistin Methanesulfonate (sodium salt) | PL 人胰脂肪酶ELISA检测试剂盒 |
| 人内皮素受AELISA试剂盒 | LXA4 人脂氧素A4ELISA检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
-stranded DNA fragments. In addition, incorporation can be limited to a single nucleotide by using [alpha-32 P]cordycepin-5´- triphosphate. This analog lacks a free 3´ hydroxyl group, preventing incorporation of additional nucleotides. 点击浏览该文件
Radiolabeling of DNA with 3 Terminal Transferase
transferase also catalyses the addition of 3′-deoxy-adenosine-5′-triphosphate (cordycepin-5′-triphosphate) onto the ends of DNA fragments. This compound is a chain terminator; it does not contain a hydroxyl group in the 3′ position, and therefore forms
Controlling elements (控制成分):玉米中的控制成分是最初由其遗传性质确认的转座单位。 分自主(能够独立转座)或者非自主(只有在一个自主元件存在下转座)两类。 Coordinate regulation (协同调控):即对一组基因的调控。 Cordycepin (蛹虫草菌素):是3¢脱氧腺苷,是RNA 聚腺苷化的阻扼子。 Core DNA (核心DNA):核心颗粒中包含的146bp DNA。 Core particle (核心颗粒):核小体的消化产物,包含组蛋白质八聚
技术资料暂无技术资料 索取技术资料








