万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
Ac-DEVD-CHO
- CAS号:
169332-60-9
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1mg 5mg
| 产品名称 | Ac-DEVD-CHO | 产品货号 | CS-01Y63720 |
| 规格 | 1mg 5mg | CAS号 | 169332-60-9 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C20H30N4O11 |
| 分子量 | 502.47 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Ac-DEVD-CHO is a specific Caspase-3 inhibitor with a Ki value of 230 pM.To ascertain the role of caspase-3 in SLNT-induced apoptosis, a caspase-3 inhibitor (Ac-DEVD-CHO) is used. The addition of Ac-DEVD-CHO significantly prevents SLNT-induced apoptosis (from 32.91±1.21% decreases to 15.88±1.58% while NC and Ac-DEVD-CHO groups are 6.45±0.96%, 7.77±0.79%, respectively)[2]. The apoptosis rates of cells pretreated with zVAD-fmk (5.32%) or Ac-DEVD-CHO (7.43%) decrease obviously after hypericin-mediated PDT treatment[3]. Remarkably, 10 μmol/L Ac-DEVD-CHO partially blocks the effect of SIN-induced apoptosis and reduces the number of apoptotic nuclei. These effects of SIN are blocked by the caspase-3 inhibitor Ac-DEVD-CHO. Camptothecin (4 μM), a positive control, increases caspase-3 activity, which is also blocked by Ac-DEVD-CHO[4].Compare with model group, in CI group, the concentrations of serum BUN are decreased significantly at all time points after operation and those of Cr are decreased significantly at 6 hours, then restored to those of the sham group at 12 hours and 24 hours; the concentrations of serum TNF-α, IL-6 are decreased and those of IL-10 are elevated significantly at all time points. [TNF-α (μg/L) 6 hours: 436.2±64.2 vs. 653.6±8.9, 12 hours: 233.4±85.4 vs. 579.7±137.1, 24 hours: 151.0±90.3 vs. 551.0±119.8, IL-6 (μg/L) 6 hours: 1033.2±345.8 vs. 1 595.3±159.4, 12 hours: 366.3±68.3 vs. 1 330.7±249.8, 24 hours: 241.2±208.4 vs. 815.3±572.7, IL-10 (μg/L) 6 hours: 33.6±10.4 vs. 26.6±4.5, 12 hours: 37.2±5.0 vs. 24.5±4.3, 24 hours: 38.3±5.5 vs. 18.2±1.6, all P<0.05]; the renal cell apoptosis rates are decreased significantly at all time points: apoptosis rates 6 hours: (13.9±3.2)% vs. (18.3±1.4)%, 12 hours: (10.5±3.6)% vs. (15.9±3.5)%, 24 hours: (8.4±1.8)% vs.(12.5±2.1)%[5]. [1]. Garcia-Calvo M, et al.nhibition of human caspases by peptide-based and macromolecular inhibitors. J Biol Chem. 1998 Dec 4;273(49):32608-13. [2]. Jinglin Wang, et al. A polysaccharide from Lentinus edodes inhibits human colon cancer cell proliferation and suppresses tumor growth in athymic nude mice. Oncotarget. 2017 Jan 3; 8(1): 610-623. [3]. Junping Zhang, et al. Hypericin-mediated photodynamic therapy induces apoptosis of myoloma SP2/0 cells depended on caspase activity in vitro. Cancer Cell Int. 2015; 15: 58 [4]. Long-gang He, et al. Sinomenine induces apoptosis in RAW 264.7 cell-derived osteoclasts in vitro via caspase-3 activation. Acta Pharmacol Sin. 2014 Feb; 35(2): 203-210. [5]. Liu LX, et al. The effect of caspase-3 inhibitor on the concentrations of serum inflammatory cytokines in sepsis related acute kidney injury induced by peritoneal cavity infection in mice. Zhongguo Wei Zhong Bing Ji Jiu Yi Xue. 2010 Dec;22(12):736-9.
化学性质:
规格:1mg 5mg
CAS:169332-60-9
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C20H30N4O11
分子量:502.47
溶解度:H2O : ≥ 50 mg/mL (99.51 mM)
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Ac-DEVD-CHO实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| H-Ser(Bzl)-OMe.HCl | VU 591 hydrochloride |
| TRPV3 74a | 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)elisa试剂盒 |
| (S)-SNAP 5114 | 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)试剂盒elisa |
| CGP 13501 | 小鼠过氧化物酶增殖物激活受α(PPAR-α)ELISA试剂盒 |
| GYKI 47261 dihydrochloride | 小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)检测试剂盒elisa |
| Podocarpic acid | 小鼠载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒ELISA |
| Vonoprazan | 小鼠网膜素(omentin)ELISA检测试剂盒 |
| Doxapram hydrochloride hydrate | 兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)elisa试剂盒 |
| Cyclothiazide | 小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA检测试剂盒 |
| Fluo-3 (potassium salt) | 小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)试剂盒ELISA |
| ML 213 | 小鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒 |
| NaV1.7 inhibitor-1 | 小鼠钩端螺旋IgG(LepIgG)检测试剂盒elisa |
| BX 430 | Ac-DEVD-CHO小鼠Toll样受9(TLR-9/CD289)试剂盒elisa |
| Aliconazole | 小鼠破骨细胞分化因子(ODF)elisa试剂盒 |
| 人线粒融合素2ELISA试剂盒 | 高ELISA检测试剂盒 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验【求助】请教Z-VAD, Ac—DEVD—CHO和Z-Asp-crnk
剂,可以抑制由Caspase 3激活导致的细胞凋亡。也可以抑制Caspase 7.Ac-DEVD-CHO是一种可逆的Caspase 3抑制剂,常用于观察特定的细胞凋亡是否通过Caspase 3激活来介导. fenghaozi LZ在回复中反复强调特定二字,是什么用意,怎么理解这里的 特定 二字,具体指什么 fenghaozi 另外该试剂在哪里可以购买,价格如何,哪个公司的性价比较好 本文由丁香园论坛提供,想
、0.5 mM EDTA、5 mM DTT,用NaOH调PH值,加双蒸水定量。4 ℃保存。2、裂解缓冲液(PH 7.5):100 mM Hepes 缓冲液、20%甘油、0.5 mM EDTA、5 mM DTT、0.2%SDS。常温保存。3、底物(Ac-DEVD-pNA):用DMSO配成终浓度为1 mM。-20 ℃保存。4、抑制剂(Ac-DEVD-CHO):用DMSO配成终浓度为10 mM贮存,用时再稀释到0.1 uM。-20 ℃保存。5、标准(pNA):用无水乙醇配成30 mg/ml,即217 mM。4 ℃
, 5~10min/次?→ECL显影或NBT/BCIP显色。结果如图9-2: 2 荧光分光光度计分析 原理:活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物,水解D4-X肽键。根据这一特点,设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC。在共价偶联时,AMC不能被激发荧光,短肽被水解后释放出AMC,自由的AMC才能被激发发射荧光。根据释放的AMC荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。方法:收获细胞正常
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









