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- 文献和实验
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999
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亦高生物
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现货
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1-3年
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1个/包,3包/箱

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文献和实验最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感;往96孔板加时不避光也没有关系,毕竟时间较短,或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.配制MTT时用用PBS溶解,也有人用生理盐水配,60℃水浴助溶。PBS配方:Nacl 8gKcl 0.2gNa2HPO4 1.44gKH2PO4 0.24g调ph 7.4定容1L关于细胞的接种(铺板)细胞过了30代以后就不要用了,因为状态不好了;培养板要用好的(最好进口板),不好的板或重复利用的板只可做预实验。接种时最好按照预实验摸索出的密度
一、材料处理1. 外植体选择在生长健壮、无病虫害的盆栽橡皮树植株上切取当年生嫩枝作为外植体。2. 材料的处理与灭菌将外植体去掉叶片及叶柄,剪成带顶芽和腋芽的茎段,长约3 -5cm 左右。先用中性洗洁精溶液浸泡10 -20min ,自来水冲洗20 -30min 。在超净台上将预处理后的外植体用75 %酒精表面消毒,无菌水冲洗3 遍。再用2%次氯酸钠浸泡振荡灭菌10 -15min 或用0.1 %升汞溶液灭菌10 -15min ,无菌水冲洗3 -5 遍,滤去无菌水后滤纸吸干备用。二、组培繁殖
素工作液;DAB工作液(武汉博士德公司)显色,自来水终止反应;脱水,透明,D·P·X封片保存。 2 结果 2.1 形态学观察结果 组织块24h开始贴壁,48~72h可见神经组织边缘游出少量细胞,主要为圆形或梭形(图1)。8~9d左右,细胞基本铺满培养孔。此时改用无血清条件培养基培养进行纯化。培养过程中,部分细胞死亡。12d左右获得的细胞胞体基本为呈圆形或多角型,直径约6~10μm。细胞核较大,胞质少(图2)。 2.2 免疫组织化学染色结果 培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色GC蛋白
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