Corning8671，2D 冻存管， 2ml 可立, 外旋

细胞培养从头学——入门篇

至0.4%即可。   八、细胞的冻存 1.先将冻存管放入4℃冰箱，约40 min。 2.接着置于-20℃冰箱，约30-60 min。 3.置于-80超低温冰箱中放置过夜。 4.置于液氮罐中长期保存。 5同时做好冻存记录，在自己的笔记本和冻存记录本上均要记录。   注意事项： 1.使用DMSO前，不需要进行高压灭菌，它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破坏它的分子结构，以至于降低冷冻保护效果。在常温下，DMSO对人体有害，故在配制时最好戴

Cell Culture Procedure

1、复苏细胞 1）液氮中取出所要的细胞，37℃水浴锅中快摇，勿让水入盖，同时将培养液放入37℃水浴锅中温育； 2）将细胞离心，同时进入超净台，无菌操作，将培养液瓶用卫生纸擦干，除菌后放入超净台，将盖子打开，瓶子放在架子上，瓶口朝火焰，将吹打吸管灭菌后吸部分培养液进入培养皿； 3）离心完毕，将细胞冻存液倾倒掉，吸入约1ml培养液到冻存管中，反复吹打，悬起细胞，吸入皿中，吹打，标好； 4) 显微镜下观察，呈圆形

细胞培养从头学

杀菌机、4℃冰箱（放置serum和培养用液）。无菌操作无菌室的灭菌：1、定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5％过氧乙酸擦拭。2、CO2孵箱（培养箱）灭菌：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％过氧乙酸，再用紫外灯照射3、实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟4、实验后灭菌：用75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。实验人员的无菌准备：1、肥皂洗手。2、穿好隔离衣、带好