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D-Glucose-6-phosphate (sodium

salt)
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  • ¥600 - 3200
  • 上海莼试
  • CS-01Y64559
  • 国产
  • 2025年11月04日
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      53

    • 英文名

      D-Glucose-6-phosphate (sodium salt)

    • CAS号

      54010-71-8

    • 供应商

      上海莼试

    • 保存条件

      Store at RT

    • 规格

      500mg 1g 5g

    本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
    产品名称 D-Glucose-6-phosphate (sodium salt) 产品货号 CS-01Y64559
    规格 500mg 1g 5g CAS号 54010-71-8
    含量 >98.00% 分子式 C6H12NaO9P
    分子量 282.12 用途 仅供科研研究使用
    化学性质:  
    产品细节图片1
            
    D-Glucose-6-phosphate (sodium salt)规格:500mg 1g 5g
    CAS:54010-71-8
    别名:G6P, Sodium Glucose-6-Phosphate
    化学名:sodium   ((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5,6-tetrahydroxytetrahydro-2H-pyran-2-yl)methyl   hydrogenphosphate
    分子式:C6H12NaO9P

    产品细节图片2
    分子量:282.12
    溶解度:10mg in PBS, pH 7.2
    储存条件:Store at RT
    General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the   ultrasonic bath for a while.
    Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or   blue ice upon request
    产品描述:
     
    产品细节图片3
     
    D-Glucose-6-phosphate is formed in cells when glucose is phosphorylated by hexokinase (or glucokinase) or by the conversion of glucose-1-phosphate by phosphoglucomutase, which is the first step of glycogen synthesis.[1] It is stored as glycogen when blood glucose levels are high. Disruption of D-glucose-6-phosphate activity leads to glycogen storage disease type I or von Gierke’s disease, a group of inherited metabolic diseases characterized by severe hypoglycemia, growth retardation, and hepatomegaly, due to accumulation of glycogen and fat in the liver.[2],[3] D-Glucose-6-phosphate is also the starting molecule of both glycolysis and the pentose phosphate pathways.[4] Because cancer cells adopt glycolysis as a major source of metabolic energy production, and the pentose phosphate pathway plays a role in helping glycolytic cancer cells to meet their anabolic demands, this compound can be used to study the progression of this process.[5]Reference:[1]. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., and Stryer, L. Section 25.5 NAD+, FAD, and coenzyme A are formed from ATP. Biochemistry 5th Edition, (2002).[2]. Cappellini, M.D., and Fiorelli, G. Glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency. Lancet 371(9606), 64-74 (2008).[3]. Beutler, E. Glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency: A historical perspective. Blood 111(1), 16-24 (2008).[4]. Gumaa, K.A., and McLean, P. The pentose phosphate pathway of glucose metabolism: Enzyme profiles and transient and steady-state content of intermediates of alternative pathways of glucose metabolism in Krebs ascites cells. Biochemistry Journal 115(5), 1009-1029 (1969).[5]. Patra, K.C., and Hay, N. The pentose phosphate pathway and cancer. Trends Biochem. Sci. 39(8), 347-354 (2014).
    使用方法: 
    产品细节图片4
     
    1. 常用筛选浓度
      注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
      一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
    2. 杀灭曲线的建立
      注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
    1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
    2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
    3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
    4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
    5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
    3. 稳定转染细胞的筛选
    1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
      注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
    2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
    3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
    4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
    5) 之后更换正常培养基培养即可。
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    产品细节图片5
     
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    蛋白酶抑制剂混合物实验步骤: 
    产品细节图片6
     
    (1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
    (2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
    (3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
    (4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
    (5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
    (6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
    (7)10,000rpm,4℃离心20min
    (8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
    (9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
    (10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
    (11)12,000rpm,4℃离心20 min
    (12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
    (13)加200ul的DEPC处理水溶解
    (14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)


     

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    图标文献和实验
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    • 6- 磷酸葡萄糖 glucose-6-phosphate

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