赛默飞世尔Thermo Fisher PONCEAU S 1

丽春红（Ponceau S）染色液的配制及使用

Molecular Formula: C 22 H 12 N 4 Na 4 O 13 S 4 Molecular Weight:：760.6 CAS Number: 6226-79-5 λ : 520 nm （water）丽春红（Ponceau S）也称猩红，可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜（nitrocellulose membrane）和醋

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

和运行时可作为样品的pH 指示剂（图 3A）。常用染料包括溴酚蓝、二甲苯青、苯酚红、和橙色 G。选择上样缓冲液时,需注意染料的表面迁移（s）（图 3B, 表 5 和 6）以避免遮盖目的核酸条带,特别是分子大小接近时（图 3C）。染料遮盖会影响目的条带的分析和量化，导致结果不可靠。 图 3. 中性pH中染料颜色。（B）在 TAE 和 TBE 缓冲液中不同百分比琼脂糖里的染料迁移。（C）在可视化过程中染料阴影遮盖条带。 3. 运行电泳 在凝胶、标准品和样品制备后，进行电泳。拆卸梳子和添加电泳

原核表达研究者关心的10个问题

。凝血酶在这三种中是特异性活性最高的，能够有效切质量比仅为1:2000的蛋白。Xa因子似乎对于切点周围的序列很敏感，经常会出现特异性位点切割不理想却发生别的位点被切割的情况。肠激酶的专一性是上述三种中最好的，但由于切割效率低（通常要求质量比达到1:10）而显得比较昂贵。另一个需要考虑的问题是：切割完成之后，是否需要去除蛋白酶。在质量比比较高的酶切反应进行完后，通常要通过色谱法处理。比较方便可行的方法是采用生物素化凝血酶(货号69672)结合链亲和素琼脂糖（货号69203）一起使用。尽管没有