赛默飞世尔Thermo Fisher B30 B569 YE

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

2. 次优样品分离。(A) 负载影响条带分辨率。 (B) 上样量过低会导致条带扭曲。 在上样缓冲液中准备好样品和分子量标准，其最终的体积通常占胶孔体积的 30%。由于孔底分布不均匀(图 2B)，使用较少的上样体积会导致条带扭曲。对于含有 DNA 结合蛋白或粘性末端的样品，凝胶上样之前，混合物需加入至 含有 SDS 的上样染料中一同加热，因为蛋白质结合以及 DNA 片段之间的相互作用会导致分离效果不佳。 c .上样染料和缓冲液选择 制备凝胶电泳时，样品中添加了凝胶上样缓冲液 (通常是 6X 或 10

介绍细胞过孔分析仪（图）

红细胞按照1：1的比例混合后测得的过孔时间分析。注意，这一分布有两个峰值，分别对应于年轻与年老红细胞这两个亚群（年轻的过孔快）。 新软件所做的改进 1992年，Fisher等人对于软件做了改进。他们把图2中每一个电信号倒置（如图5所示），由此定义了8个参数。其中5个参数的定义示于图5：过孔时间（TT），高度（H），上升时间（RT），下落时间（FT），阈值宽度（TW，阈值取为脉冲高度的55%，相应于细胞体积恰有一半入孔的时刻）。此外还有3个参数：上升速率（RR）和下落速率（FR）分别指上升

Immuno-Laser Capture Microdissection

(A) and immunostained for CD45RO (B). Immunostaining highlights T cells within the germinal center and in the perifollicular area and makes architectural features more evident. Magnification x100. Figs. C & D : Microdissection from germinal centers