- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y64896
- 国产
- 2025年10月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
34
- 英文名：
Fructosyl-lysine dihydrochloride
- CAS号：
96192-35-7
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
4°C, protect from light, stored under nitrogen
- 规格：
5mg 10mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
化学性质:
Fructosyl-lysine dihydrochloride规格：5mg 10mg
CAS：96192-35-7
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C12H26Cl2N2O7
分子量：381.25
溶解度：N/A
储存条件：4°C, protect from light, stored under nitrogen
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Fructosyl-lysine (Fructoselysine) dihydrochloride is an amadori glycation product from the reaction of glucose and lysine by the Maillard reaction. Fructosyl-lysine dihydrochloride is the precursor to glucosepane, a lysine-arginine protein cross-link that can be an indicator in diabetes detection[1].Fructosyl-lysine dihydrochloride (5 mM; 0.5 hours) catalyzes the ATP-dependent conversion of [14C]fructoselysine to anionic products suggesting the existence of a fructoselysine-kinase activity in E .coli extracts[2].Fructosyl-lysine dihydrochloride (100 μM; 1 hour) contains a carbohydrate moiety and appears to be phosphorylated, it can be converted to glucose 6-phosphate in bacterial extracts in E .coli extracts[2].Fructosyl-lysine dihydrochloride (25 mM; 25 hours) lets E. coli growth at a rate of about one-third of that orved with glucose as a carbon source. Lysine itself does not support growth in the ance of other carbon source and does not affect the growth orved with glucose[2].Fructosyl-lysine dihydrochloride and AGE residues is increased markedly in glomeruli, retina, sciatic nerve, and plasma protein in diabetic rats[1].[1]. Rabbani N, et al. Hidden complexities in the measurement of fructosyl-lysine and advanced glycation end products for risk prediction of vascular complications of diabetes. Diabetes. 2015 Jan;64(1):9-11. [2]. Karachalias N, et al. Accumulation of fructosyl-lysine and advanced glycation end products in the kidney, retina and peripheral nerve of streptozotocin-induced diabetic rats. Biochem Soc Trans. 2003 Dec;31(Pt 6):1423-5.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Fructosyl-lysine dihydrochloride | 产品货号 | CS-01Y64896 |
| 规格 | 5mg 10mg | CAS号 | 96192-35-7 |
| 含量 | >95.00% | 分子式 | C12H26Cl2N2O7 |
| 分子量 | 381.25 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Fructosyl-lysine dihydrochloride规格：5mg 10mg
CAS：96192-35-7
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C12H26Cl2N2O7
分子量：381.25
溶解度：N/A
储存条件：4°C, protect from light, stored under nitrogen
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Fructosyl-lysine (Fructoselysine) dihydrochloride is an amadori glycation product from the reaction of glucose and lysine by the Maillard reaction. Fructosyl-lysine dihydrochloride is the precursor to glucosepane, a lysine-arginine protein cross-link that can be an indicator in diabetes detection[1].Fructosyl-lysine dihydrochloride (5 mM; 0.5 hours) catalyzes the ATP-dependent conversion of [14C]fructoselysine to anionic products suggesting the existence of a fructoselysine-kinase activity in E .coli extracts[2].Fructosyl-lysine dihydrochloride (100 μM; 1 hour) contains a carbohydrate moiety and appears to be phosphorylated, it can be converted to glucose 6-phosphate in bacterial extracts in E .coli extracts[2].Fructosyl-lysine dihydrochloride (25 mM; 25 hours) lets E. coli growth at a rate of about one-third of that orved with glucose as a carbon source. Lysine itself does not support growth in the ance of other carbon source and does not affect the growth orved with glucose[2].Fructosyl-lysine dihydrochloride and AGE residues is increased markedly in glomeruli, retina, sciatic nerve, and plasma protein in diabetic rats[1].[1]. Rabbani N, et al. Hidden complexities in the measurement of fructosyl-lysine and advanced glycation end products for risk prediction of vascular complications of diabetes. Diabetes. 2015 Jan;64(1):9-11. [2]. Karachalias N, et al. Accumulation of fructosyl-lysine and advanced glycation end products in the kidney, retina and peripheral nerve of streptozotocin-induced diabetic rats. Biochem Soc Trans. 2003 Dec;31(Pt 6):1423-5.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| H-D-Glu(OMe)-OH | AT7519 |
| Ferutinin | 兔基质金属蛋白酶抑制因子1ELISA试剂盒 |
| 7,8-Dihydroneopterin | 兔碱性成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒 |
| β-Boswellic acid | 兔降钙素原ELISA试剂盒 |
| 12(S)-HETE | 兔碱性磷酸酶ELISA试剂盒 |
| Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide | 兔结缔组织生长因子ELISA试剂盒 |
| (-)-Huperzine A | 兔结合珠蛋白ELISA试剂盒 |
| Iloperidone metabolite P95 | 兔粒细胞集落刺激因子ELISA试剂盒 |
| CAY10703 | 兔基质金属蛋白酶9ELISA试剂盒 |
| Betacarotene | 兔基质金属蛋白酶3ELISA试剂盒 |
| Aflatoxin G1-13C17 | 兔基质金属蛋白酶2ELISA试剂盒 |
| Allantoic acid | 兔基质金属蛋白酶13ELISA试剂盒 |
| Imidapril HCl | Fructosyl-lysine dihydrochloride兔缓激肽ELISA试剂盒 |
| Tilmicosin | 兔环磷酸腺苷ELISA试剂盒 |
| 人肝配蛋白B3ELISA试剂盒 | 兔环磷酸鸟苷ELISA试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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Protocols for Lysine Conjugation
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POLY-L-LYSINE COATED SLIDES SOLUTIONS --5% Chromic acid --0.01% Poly-L-Lysine (PLL) - made from a dry protein, with distilled water. (100mg/1 litre) This procedure can be carried out on either a ski or carousel staining
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