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文献和实验一次做对!Erastin诱导HepG2细胞铁死亡实验的黄金操作手册请收好!
-1能够有效逆转Erastin所诱导的铁死亡特征性改变。 (2) GPX4、胱氨酸摄取检测 取接种于6孔板的细胞,以10 μmol/L Erastin处理24 h,对照组加入等体积DMSO。收集细胞后,分别使用GPX4比色法测试盒和胱氨酸摄取荧光法测试盒进行检测。 图3. GPX4检测结果 图4. 胱氨酸检测结果 实验结果显示,与对照组相比,Erastin处理组细胞的胱氨酸摄取能力显著降低,同时GPX4酶活性亦呈现明显下降趋势,二者均与铁死亡发生的分子机制相吻
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 nicotinamide ade-nine dinucleotide
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 nicotinamide ade- nine dinucleotide 缩写 NAD。也称二磷酸吡啶核苷酸(缩写 DPN),或辅脱氢酶( codehydrogenase) Ⅰ或辅酶Ⅰ。在 260毫微米处具有最大紫外吸收光谱,通过各种脱氨酶,从底物中接受一个氢原子和一个电子,变成还原型。 E′ 0=-0.32V。这时吡啶环被还原,由于在 340毫微米处有最大吸收,所以对反应的进行可以测定。这个反应也能可逆地进行。因此 NAD 可作为各种脱氨酶的一种共同
酶活力的大小常以每mg酶蛋白每分钟所分解的底物量(或生成的产物量)μmol数表示之。测定酶活性的方法很多,常因反应的底物和产物的性质不同可选用不同的方法,应用最广泛的是比色法或分光光度法。凡反应系统中的化合物在紫外区或可见光区有吸收峰的都可以用这种方法进行测定。如果酶催化的是一需氧反应,如氧化酶,则可用测压法或氧电极法。如果催化的反应系统中需要ATP或产生ATP,如一些激酶;或是有NAD存在,如一些脱氢酶和氧化还原酶;或者反应产生H2O2,如一些氧化酶,这些酶的活性可以用生物发光或化学发光方法进行
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