Millipore-超滤管Amicon Ultra-15 [

干货：小分子量蛋白（11KD）WB实验艰辛历程及经验总结

的位置就停止电泳了，这时候marker已经分开一些了。7、接上一条，marker分开了一些，但是实话说分的并不好，你如果想同时测好几个蛋白指标是很困难的，不好切胶，也不好敷条带，所以我的建议，小分子蛋白就单独出来跑吧。8、电泳完成后，开始电转，电转过程我试过90V恒压60分钟，也试过250ma恒流15分钟，对于我的蛋白都能得到满意结果。9、转膜后条带是否必须戊二醛固定？经过我的尝试，对于我的11KD蛋白来说固定不固定没有影响，那么即使固定了，戊二醛也不会影响后续的抗原抗体反应。所以各位同学们固定

超滤离心管怎么使用？

1/3~1/5的膜；透过目标物，孔径应选5-10倍的膜。 【求助】准备用millipore 的超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白，在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子，但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是Amicon Ultra 15ml规格的管子，不知道有没有谁以前做过的，有关于转速，时间给一些建议，另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理？离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失？如果要把管子重复利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是将其浸到乙醇中防于4度，还是在管子中灌入

影响蛋白超滤的因素以及使用超滤膜的注意事项

，如果希望100%截留某个蛋白，一般膜孔径选择为目标蛋白的1/3-1/5。 (八)问题：用10KD，15ml的超滤管超滤含20KD目的蛋白的蛋白溶液，会不会有目的蛋白穿过滤膜呢，我同学用这个超滤管超滤17KD的蛋白液，竟然有目的蛋白透过滤膜 可能会有一定的透过损失，因为截留和分子的形状也有关系。 为了100%截留, 超滤膜的截留分子量最好是目的蛋白的1/3比较保险 (九)问题：我们公司需要的是通过超滤管的那部分液体，将我们的产品分离，我说的超滤液就是指离心