赛默飞世尔Thermo Fisher 0.01 M KCL,

v468 Chapter 2 Wnt活性蛋白分离及应用

a change in specific activity. 3.2. Preparation of Wnt3A CM for Fractionation 1. To the filtered CM from Section 3.1 , add Triton X-100 to1% (v/v), Tris-HCl, pH 7.5, to 20 mM, and NaN 3 to 0.01%(w/v) (e.g., to 930 mL CM, add 50 mL of 20% (v/v) TritonX

植物质膜蛋白的提取和溶解

( 1 ) 制备葡聚糖 T-500：由于右旋糖酐 T-500 易潮，必须检测提取浓度。首先，220 g 葡聚糖 T-500 溶解在 780 g 水中轻微摇动。完成溶解大约需要 2 h。然后 5 g 的溶液溶解在 25 ml 水中并且在 589 nm 测量旋光度，作为具体的旋光度是 + 199 ° /ml/g/dm，终浓度（％，m/m) 由以下公式得出：旋光度 X  25  X 100/199X5 。 为了确保用于一系列的实验的葡聚糖 T-500 的一致性，一次要多制备一些，尤其是如果没有用旋光

原创：western protocol

1.5M Tris(PH 8.8) 100ml 18.171g (at4°C) 10% SDS 100 ml 10g (at room temperature) 10% ammonium persulfate 1ml 0.1g(replace every week store at at4°C) TEMED 8 room temprature Antibodies Primary antibody: 5A11(anti-mouse IgG) 500x-1000x Secondary