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文献和实验样本若暂时不测定,可低温冻存,避免反复冻融。一般-20℃可保存半个月,-80℃可保存一个月。特殊指标对样本有较高要求除外。制备好的组织匀浆建议不要冻存,最好当天进行测定。 三、细胞样本的收集和处理 1. 悬浮细胞 悬浮细胞可以直接离心来收集细胞沉淀,具体操作:4°C,1000×g离心10 min,弃上清留细胞沉淀。按照106个细胞加入300-500 μL匀浆介质,进行机械匀浆,充分破碎(无明显的细胞沉淀,可在显微镜下观察)。4°C,10000×g离心10 min,取上清置于冰上待测。 2. 贴壁细胞 吸
) mimics,经检测在人类、小鼠、大鼠中均无同源片段,最大限度降低了对定量实验造成的干扰,适用于内参表达不稳定的外泌体或暂未发现合适内参的其他样品,对目的 microRNA 进行相对定量。外参序列:ucaccggguguaaaucagcuug。cel-miR-39-3p外参正序列为 AACACGCTCACCGGGTGTAA。 18、外泌体专用培养基是否可用于重悬、接种以及继续培养细胞? A:不可以。外泌体专用培养基不含促细胞贴壁的因子,可以维持已贴壁的细胞一定时间内的生长,无法替代完全培养基长期
Healthcare Life Sciences #17 - 1440 - 02) RPMI 1640 培养基(Invitrogen) 胎牛血清(FBS)(GIBCO) 双抗 P/S(Penicillin/ Streptomycin) (GIBCO) 二甲亚砜(DMSO)(SIGMA) 预先装好异丙醇的冻存盒 2. 方法/步骤 配制所需的溶液: a. 细胞培养基:RPMI 1640 + 10% FBS+ 1% P/S; b. 细胞冻存液:FBS 中加入 10%DMSO; (1)在离心管中加入淋巴
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