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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 靶点:
电询
- 应用范围:
科研实验
- 供应商:
上海笃玛生物科技有限公司
- 级别:
电询
- 抗原来源:
电询
- 规格:
100管/96样/50管/48样
| 规格: | 100管/96样 | 产品价格: | ¥650.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50管/48样 | 产品价格: | ¥350.0 |
NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒
产品简介苹果酸酶是生物体内重要的酶之一,广泛存在于动物、植物、细菌体中。是苹果酸代谢的关键酶。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。该酶发挥作用需要辅酶因子的参与,依据辅酶因子的不同,分为NAD-ME(EC 1.1.1.38)和NADP-ME(EC 1.1.1.40)。
ME的主要功能是催化苹果酸氧化脱羧产生酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,NADP-ME催化NAD+还原成NADH,本试剂盒通过检测NADH在340nm处的增加速率即可得出NAD-ME的酶活性大小。
中文名称NAD-苹果酸酶(NAD-ME)活性检测试剂盒
储存条件-20℃
有效期6个月
英文名称NAD Malic Enzyme(NAD-ME) Activity Assay Kit
别名NAD-苹果酸酶试剂盒 NAD-ME Kit NAD-苹果酸酶(NAD-ME)试剂盒 NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒
检测方法微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader;紫外分光光度法 Spectrophotometer

测定意义
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
测定原理
NAD-ME催化NAD+还原成NADH,在340nm下测定NADH增加速率。
需要的仪器,耗材:紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
以上数据均来自公开文献, 仅供参考。
样本测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 1000~2000:1 的比例(建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒
检测方法:微量法
本品仅用于科研实验,不用于临床。
生化检测试剂盒的基本原理
生化检测试剂盒,又称生化试剂盒,是利用特定的生物成分、动力学及化学反应等技术制备的试剂盒,用于检测生理学、病理学、药理学等领域中特定的生物分子或化学物质。生化检测试剂盒包括底物、酶试剂盒、探针等多个组成部分,其中最常用的是底物-酶法.
底物-酶法是生化检测试剂盒检测的基本原理。在该过程中,底物与酶在细胞膜上结合形成基质酶,进而形成庇物-酶复合物。随着时间的推移,底物-酶复合物逐渐分解,释放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物,未完全消化的底物可以被一系列的酶代谢,同时底物、酶和代谢产物都会对复合物的稳定性产生影响,从而影响检测试剂盒的检测结果。
生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?
生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:
1)于生化检测而言,样本最-好无溶血、脂血、黄-热的现象,组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。
2)样本处理后最-好尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。
3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。
4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。

苹果酸酶 malic enzyme
已知有三种苹果酸酶(ME1.1.1.38—40)。其中以NADP为受体的酶(ME1.1.1.40)催化生成下列反应:
ΔG°′=-0.36千卡。酸羧化反应(是H.G.Wood和C.H.Werkman,1938最初发现的反应)中有的是苹果酸酶的作用,有的是酸羧化酶的作用,在生物体内已知以后者的作用为主。两者都是供给三羧酸循环中间体的补充反应。苹果酸酶在胞浆内催化苹果酸脱羧是乙酰CoA从线粒体进入胞浆的柠檬酸--酸循环的一部分,其产生的NADPH很多将用于脂肪酸的合成。
ME1是一种普遍存在的四聚体蛋白,可以催化可逆的氧化脱羧反应的L-苹果酸转变为酸,这个反应涉及到了NAD(P)+ 向 NAD(P)H的转化,将糖酵解途径和柠檬酸循环联系起来。
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文献和实验系催化水解 NAD 的烟酰胺和核糖的糖苷键的酶,可生成烟酰胺和 ADP核糖, EC3. 2. 2. 5。存在于动物的脑、脾脏、链孢霉、细菌的这种酶亦作用于 NADP 和脱氨 NAD ,存在于红血球的酶仅作用于 NAD ,此酶可被烟酰胺抑制。
1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活,必须了解酶催化反应总的反应式,而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量,使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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