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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
100ml/500mL
| 规格: | 100ml | 产品价格: | ¥128.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500mL | 产品价格: | ¥540.0 |
胰蛋白酶(Trypsin)是一种丝氨酸水解酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。
重组胰蛋白酶消化液是一种可以替代传统胰酶消化液,完全不含动物源性物质的即用型重组胰酶细胞消化液。适合用于一些严格要求使用无动物源性胰酶消化液细胞的消化,消除了潜在致病污染物的危害。对细胞非常温和,因此不需要酶抑制剂,而是仅通过稀释来灭活酶的作用。
产品信息:
| 形态 | 液体 |
| 浓度 | 1x |
| 规格 | 100ml/500ml |
| PH | 7.20~7.40 |
| 溶剂 | DPBS |
| EDTA•2Na | 0.2g/L |
| 酚红指示剂 | 无 |
| 储存条件 | 2~8℃ |
| 运输条件 | 低温 |
| 有效期 | 12个月 |
产品数据:
表1 胰酶消化能力对比数据表
| 细胞系名称 | 传统胰酶 | 普诺赛重组胰酶 |
| VERO(非洲绿猴肾细胞) | 5 min | 3 min |
| MCF-10A(人正常乳腺上皮) | 8 min | 6 min |
表2 胰酶消化前后细胞状态对比
| 细胞 | Vero | ||
| 分类 | 消化前 | 消化后 | 完全消化时间(min) |
| 对照组 | 1 |
1 |
4 |
| 实验组 | 1 |
1 |
3 |
| 细胞 | MCF-10A | ||
| 分类 | 消化前 | 消化后 | 完全消化时间(min) |
| 对照组 | 1 |
1 |
8 |
| 实验组 | 1 |
1 |
4 |
产品特性:
1、低内毒素,无细菌、真菌、支原体、噬菌体等污染;
2、无动物源成分;
3、属于温和消化酶,消化中对细胞损伤最小;
4、适用于原代干细胞消化。
注意事项:
1、本产品经0.1μm过滤除菌;
2、使用本产品时应注意无菌操作,避免污染;
3、本产品为浓度,可以直接用于消化细胞;
4、本产品不建议直接置于37℃预温,否则胰酶的活力会有一定的损失;
5、本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。
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文献和实验样品:重组胰蛋白酶,比活 4500USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适 pH 的研究 准备 pH 为 3~12 的底物 BAEE(0.25 mM),分别测定 rPT 纯酶液的活性,最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6),25 mM Tris-HCl (pH 7~8),25
样品:重组胰蛋白酶,比活 4000USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适温度的研究 将底物 BAEE(0.25 mM)分别置于 4℃、15℃、20℃、25℃、30℃、40℃、50℃、60℃ 和 70℃ 水浴中温浴 20 min,加入相同体积的 RPT 酶液测定 rPT 的活力,结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。 2. 温度稳定性的研究 取
的 PBS)离心洗涤 1~2 次; 若悬液中有明显的沉淀块,需用 200~300 目的滤网过滤后再用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)洗涤 1~2 次; 用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)调整浓度至 1x107/mL 备用。 六、贴壁细胞的制备 吸除培养基上清液,用含无钙、镁离子的PBS漂洗一次; 以 25 mL 培养基为例,加入 1 mL 消化液(0.1%胰蛋白酶),置室温(25℃)或 37℃ 消化 2~5 min;或者加入 1 mL 的 EDTA
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