- ￥15000
- MeisenCTCC
- CTCC-001-0871
- 2025年12月15日
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- 详细信息
- 技术资料
- 英文名：
PODO/TERT256
- 库存：
100
- 细胞类型：
足细胞（ podocytes cell ）
- 组织来源：
肾（Kidney）
- 物种来源：
人源
- 生长状态：
贴壁生长（Adherent）
- 规格：
T25/冻存管
| 细胞名称 | 永生化肾足细胞系 |
| 英文名称 | PODO/TERT256 |
| 规格 | T25/冻存管 |
| 货号 | CTCC-001-0871 |
| 种属 | 人源（Homo sapiens） |
| 组织来源 | 肾（Kidney） |
| 疾病 | 未知（Unknow） |
| 性别 | 女（Female） |
| 年龄 | 未知（Unknow） |
| 培养体系 | 该细胞系培养所用基本培养基为 DMEM/F12,配置完全培养基时需 加入1.6 mM GlutaMAX-I ,0.03 mg/ml Endothelial Cell Growth Supplement (ECGS),8 ng/ml hEGF,20 ng/ml Hydrocortisone,20%FBS，100 µg/ml G418,1%Anti-Anti。 |
| 细胞形态 | 足细胞（ podocytes cell ） |
| 生长特性 | 贴壁生长（Adherent） |
培养瓶中细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞，寄送前，我们会将运输培养基（收到后请使用完全培养基培养）充满整个培养瓶，以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸，且有些细胞对温度变化也很敏感，可能存在一些细胞脱落漂浮的情况，这些细胞仍是活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁的细胞，在生物安全柜环境中，用真空泵去除培养瓶中的多余培养基，至剩余5-8mL左右，随后将细胞置于含有5%CO的37℃恒温 培养箱中培养，拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶请立即传代。
3. 对于悬浮的细胞，在生物安全柜环境中，转移培养瓶中的细胞至离心管中，离心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培养基吹散细胞，转移至新的培养瓶中，随后置于含有5% CO 的37℃恒温培养箱中培养。
冻存管细胞操作步骤
注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养。
贴壁细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入PBS洗涤2-3次。
2. 加入 1.0 mL 0.05（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm2 培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心200x g/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO 的37℃恒温培养箱中培养。分化处理放入37℃孵育箱。若用于分化可直接铺板，一个 75cm2瓶足细胞一般可用以铺 5 个 6 孔板中用以分化处理。
传代比例：建议 1:2 至 1:3（以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
注意：培养板需预先进行包被（包被液组分为： 0.15mg/ml Rat tailtype-I collagen solution ）
培养板包被：
1、准备配置好上述包被液组分（4℃可放置1个月）
2、向培养板中加入包被液，轻轻晃动至培养板底部全部覆盖均匀（75cm2底面积，需加入4.5mL 包被液）
3、将培养板置于室温，孵育1h
4、使用前，将包被液吸走，PBS洗涤2-3次。
细胞冻存液
细胞冻存液，请使用产品： Cryo Frozen Medium(Cat#CTCC-002-002)离心收集细胞后，加入适量冻存液（每管细胞冻存量达到10的6次方），将冻存管放入冻存盒置于负80冰箱，24h后将冻存管转入液氮长期保存。
完全培养基配制
该细胞系培养所用基本培养基为DMEM/F12,配置完全培养基时需加入1.6 mM GlutaMAX-I ,0.03mg/ml Endothelial Cell GrowthSupplement (ECGS),8 ng/mlhEGF,20 ng/ml Hydrocortisone,20%FBS，100 µg/mlG418,1%Anti-Anti。
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永生化肾足细胞系PODO/TERT256
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