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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
KYSE-30人食管癌细胞(Luc标记)
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 细胞类型:
详见说明
- 组织来源:
详见说明
- 物种来源:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 运输方式:
常温/冷冻
- 生长状态:
详见说明
- 规格:
T/25*1瓶
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KYSE-30人食管癌细胞(Luc标记)哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时,可进行传代。
2)在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃PBS;
4)向瓶内加入消化液1ml,浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min;
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中,将悬液吸入15ml离心管;
注:如还有部分细胞未消化下来,可采用分步消化:
① 准备一个无菌的15ml离心管,加入2ml含10%FBS的完全培养基;
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打);
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和,中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min;
7)准备两个新的T-25培养瓶,各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后,弃上清,用2ml完全培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶,每个培养瓶各1ml;
9)水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于37℃,5%CO2培养箱中静置培养。

冻存 (细胞冻存建议每瓶T25冻一支)
1)~6)参照传代步骤
7)离心完成后,弃上清,用1mL冻存液重悬细胞沉淀,然后转入1.8ml冻存管中;
8)将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
9)第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。

产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购KYSE-30人食管癌细胞(Luc标记)哪里买,其他相关产品
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文献和实验度(BL/CL信号)可达100-200mm。而通过与光学显微镜的配合,他们还可以用来分析微样品,比如组织切片、单细胞或者微芯片设备,其空间解析度高达0.4mm。虽然保持了高度的检测能力,但是通过选择合适的光学系统可以将光损失最小化。 组织切片和单细胞 原位CL(化学发光)杂交检测方法是基于标记的寡核苷酸探针与目标核酸序列特异性原位杂交,再进行CL检测。这种方法不但可以定位还可以定量检测在细胞或组织中目标序列的数量。目前已发展了数种可以在组织或细胞中单检测或双检测病毒核酸的CL原位杂交方法。[33
体提取液进行纸电泳,染色后在紫外光下观察荧光即可。nptⅡ、cat及庆大霉素转移酶基因,均为抗生素筛选基因,相关的酶可以对底物进行修饰(磷酸化、乙酰化等),从而使这些抗生素失去对植物生长的抑制作用,使得含有这些抗性基因的转化体能在含这些抗生素的筛选培养基上正常生长,也可以用转化体提取液体,外用同位素标记,放射自显影筛选转化体。目前常用的一种报告基因是β-D-葡萄糖苷酶基因,该酶催化底物形成β-D-葡萄糖苷酸,它在植物体中几乎无背景,组织化学检测很稳定,可用分光光谱、荧光等进行检测。荧光酶基因(luc
。标记细胞的方法基本上是通过分子生物学克隆技术,将荧光素酶的基因插到预期观察的细胞的染色体内,通过单克隆细胞技术的筛选,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。目前,常用的细胞株基本上都已标记好,市场上已有销售。将标记好的细胞注入小鼠体内后,观测前需要注射荧光素酶的底物—荧光素,为约280道尔顿的小分子。荧光素脂溶性非常好,很容易透过血脑屏障。注射一次荧光素能保持小鼠体内荧光素酶标记的细胞发光30~45分钟。每次荧光素酶催化反应只产生一个光子,这是肉眼无法观察到的,精诺真公司(Xenogen Corp
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