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- 2025年07月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
143B人骨肉瘤细胞（GFP标记）
- 库存：
999
- 供应商：
上海圻明
- 细胞类型：
详见说明
- 组织来源：
详见说明
- 物种来源：
详见说明
- 细胞形态：
详见说明
- 运输方式：
常温/冷冻
- 生长状态：
详见说明
- 规格：
T/25*1瓶
欢迎光临圻明生物细胞专场，我们拥有上千种类齐全的细胞资源库，让广大科研工作者买的放心，用的省心！
143B人骨肉瘤细胞（GFP标记）哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时，可进行传代。
2)在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，收集瓶内的培养基；
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后，水平放置培养瓶，使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积，吸弃PBS；
4)向瓶内加入消化液1ml，浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min；
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起，若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中，将悬液吸入15ml离心管；
注：如还有部分细胞未消化下来，可采用分步消化：
① 准备一个无菌的15ml离心管，加入2ml含10%FBS的完全培养基；
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和（避免吹打）；
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右，轻拍培养瓶，95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和，中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min；
7)准备两个新的T-25培养瓶，各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后，弃上清，用2ml完全培养基重悬离心细胞，将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶，每个培养瓶各1ml；
9)水平放置培养瓶，震荡混匀后，将培养瓶置于37℃，5%CO2培养箱中静置培养。
冻存 （细胞冻存建议每瓶T25冻一支）
1）~6）参照传代步骤
7）离心完成后，弃上清，用1mL冻存液重悬细胞沉淀，然后转入1.8ml冻存管中；
8）将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中，之后转入-80℃冰箱中过夜降温；
9）第二天，取出降温完成的序降温盒中的冻存管，尽快转入液氮罐中保存。
产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购143B人骨肉瘤细胞（GFP标记）哪里买，其他相关产品
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文献和实验处（包括双链 DNA 断裂位点）的募集过程。采集的图像不仅帮助我们确定募集到断裂位点修复蛋白的动力学信息和聚集水平，还验证了内源转录调节因子和 DDR 通路因子在 DNA 断裂位点的共定位。 图 1：实验方案示意图 将 MRE11 cDNA 克隆到带有 GFP 标签的表达载体中，然后将其转染到 U2OS 细胞。在使用溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）或 Hoechst 进行标记后，使用 FV3000 共聚焦显微镜的 405 nm 激光对核内目标区域（ROI）进行线扫描诱导 DNA 损伤。随后使用
状态与特征简述:细胞贴壁生长，呈梭状或不规则状，增长速度很快，一般1：3传代分瓶，3天后可以长满； HOS细胞系，人骨肉瘤细胞系 MEM+5%FBS（Hyclone） 图片为20x，传代后2天 红色荧光为invitrogen公司下属molecular probe公司荧光染料Mitotracker Red，示线粒体分布。 9901细胞系，人骨肉瘤细胞系 1640+5%FBS（Hyclone） 图片为20x，传代后2天 红色荧光为invitrogen公司下属molecular probe公司
293，CHO-S，DG44和CHO-K1细胞，来源于经筛选转染效率更高的亚细胞系。这些细胞也可用于无血清和限定化学成分培养基。重组蛋白的大规模生产一般在稳定转染的悬浮细胞中进行。这些细胞易于生长到高密度并合成更多蛋白，使用基质珠做为固相支持可以使贴壁细胞悬浮生长。 11转染效率的验证 最有效的验证方式必须是qPCR验证。 荧光观察，使用病毒转染，明白自己病毒的情况，是荧光标记（一般是GFP）还是非荧光标记。质粒转染，可以在载体上添加荧光标记，帮助自己通过荧光观察转染效率。但是荧光并不能完全证明转染
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