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- 详细信息
- 文献和实验
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- 英文名:
RAW264.7小鼠单核细胞巨噬细胞(GFP标记)
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 细胞类型:
详见说明
- 组织来源:
详见说明
- 物种来源:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 运输方式:
常温/冷冻
- 生长状态:
详见说明
- 规格:
T/25*1瓶
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RAW264.7小鼠单核细胞巨噬细胞(GFP标记)哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时,可进行传代。
2)在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃PBS;
4)向瓶内加入消化液1ml,浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min;
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中,将悬液吸入15ml离心管;
注:如还有部分细胞未消化下来,可采用分步消化:
① 准备一个无菌的15ml离心管,加入2ml含10%FBS的完全培养基;
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打);
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和,中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min;
7)准备两个新的T-25培养瓶,各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后,弃上清,用2ml完全培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶,每个培养瓶各1ml;
9)水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于37℃,5%CO2培养箱中静置培养。

冻存 (细胞冻存建议每瓶T25冻一支)
1)~6)参照传代步骤
7)离心完成后,弃上清,用1mL冻存液重悬细胞沉淀,然后转入1.8ml冻存管中;
8)将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
9)第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。

产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购RAW264.7小鼠单核细胞巨噬细胞(GFP标记)哪里买,其他相关产品
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文献和实验,高表达 CD14(Cat#E-AB-F1084)和低表达 CD16(Cat#E-AB-F1005)被认为是单核细胞的特征。人的单核细胞分化成巨噬细胞时,CD14表达水平下降,CD16 表达水平升高,与单核细胞能明显区分;小鼠成熟的巨噬细胞则高表达 F4/80(Cat#E-AB-F0995),流式检测时用CD11b 和 F4/80 可以与其他单核细胞区分。巨噬细胞,正如它的名字所提示的,具有吞噬的功能,主要功能是清除被抗体识别的感染或异化的细胞和凋亡或坏死的细胞,是机体内的清道夫。巨噬细胞的消化
毒性作用。EST12 蛋白导致小鼠腹腔巨噬细胞(图 1A 和 B)、人单核细胞 THP-1(图 1C)和小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)死亡(图 1D)。结果表明,EST12 对巨噬细胞具有较强的毒性。 图 1 巨噬细胞焦亡诱导蛋白 EST12 的鉴定 A-D:分别用 EST12 和 Rv1577 处理小鼠腹腔巨噬细胞(A、B)、PMA 分化的 THP1 细胞(C)、小鼠骨髓巨噬细胞 BMDMS(D),采用 LDH 释放法分析。E:WB 检测 2μM EST12 或 RV1577 处理巨噬细胞
MOI 值 50-200,puromycin 常规剂量 1-2 µg/mL;一般不需要加助转剂 polybrene。 ②Jurkat 细胞 Jurkat 细胞是一种常用的人类T细胞白血病细胞系,是一种悬浮细胞。慢病毒感染悬浮细胞步骤可以参考上文。 Jurkat 细胞感染慢病毒的 MOI 以 50-80 为宜,一般不需要加助转剂 polybrene。 图 6:慢病毒感染 Jurkat 细胞 ③RAW264.7 细胞 RAW264.7 中文全名为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,属贴壁细胞,最好的形态呈现
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