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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
小鼠心肌细胞(胎鼠)
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 细胞类型:
详见说明
- 组织来源:
详见说明
- 物种来源:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 运输方式:
常温/冷冻
- 生长状态:
详见说明
- 规格:
T/25*1瓶
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小鼠心肌细胞(胎鼠)哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时,可进行传代。
2)在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃PBS;
4)向瓶内加入消化液1ml,浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min;
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中,将悬液吸入15ml离心管;
注:如还有部分细胞未消化下来,可采用分步消化:
① 准备一个无菌的15ml离心管,加入2ml含10%FBS的完全培养基;
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打);
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和,中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min;
7)准备两个新的T-25培养瓶,各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后,弃上清,用2ml完全培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶,每个培养瓶各1ml;
9)水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于37℃,5%CO2培养箱中静置培养。

冻存 (细胞冻存建议每瓶T25冻一支)
1)~6)参照传代步骤
7)离心完成后,弃上清,用1mL冻存液重悬细胞沉淀,然后转入1.8ml冻存管中;
8)将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
9)第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。

产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购小鼠心肌细胞(胎鼠)哪里买,其他相关产品
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文献和实验一、概述 整体动物心肌细胞的增殖能力在出生后仅能维持一个短时期,小鼠在出生3周后DNA合成所需的酶的活性及心肌细胞的增殖能力就明显降低至成年鼠水平。小鼠心肌细胞的原代培养,一般选用生后1-10d的乳鼠心脏,尤以出生1-4d的较好,此时心肌细胞已分化充分,适于作各种研究,而出生4d以后的乳鼠心脏中分离出来的心肌细胞较慢发育成为有自律性搏动的心肌细胞。二、试剂1、培养液:1:1 混合的DMEM / F12 培养液,添加终浓度为10%小牛血清(FCS)、100IU/ml 青霉素、100μg/ml
原代心肌细胞的培养及实验方案 取出生后0~24 h C57BL/6cr小鼠心脏,按改良的Lader方法进行细胞的分离。 获取博动的心脏迅速放置于无Ca2+、Mg2+的Hank’s平衡液中。剪碎心脏,放置在4℃条件下100 g/L的Trypsin溶液中消化16~18 h,用Trypsin抑制剂中止消化。然后在37℃下,用胶原酶Ⅱ于CO2培养箱内,在摇床上继续孵化消化45~60 min,最后用70 μm直径尼龙过滤网过滤获取心肌细胞,用含有25 mmol/L HCO3-,100 mL/L
的材料一致。胎鼠就要胎鼠,新生鼠就要新生鼠,不能混淆。因为新生鼠有一些受体,在培养的工作中失去功能,会不能再生,比如NMDA受体。和文献不同会导致错误结论,甚至困惑。很多人写信问我新生鼠的培养问题,我回答用新生鼠的实验很少,八成是你自己搞错了实验对象,请确认国际上的相关研究文献所用老鼠,再来问我下面的问题。 2. 培养基选择 我强烈不建议用血清培养。原因是: 首先,血清刺激胶质细胞和杂细胞分裂,最后非常影响神经元产量; 其次,为了抑制胶质生长,往往要加入阿糖孢苷。严重
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