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- 2025年07月15日
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- 技术资料
- 英文名：
大鼠肾小管上皮细胞
- 库存：
999
- 供应商：
上海圻明
- 细胞类型：
详见说明
- 组织来源：
详见说明
- 物种来源：
详见说明
- 细胞形态：
详见说明
- 运输方式：
常温/冷冻
- 生长状态：
详见说明
- 规格：
T/25*1瓶
欢迎光临圻明生物细胞专场，我们拥有上千种类齐全的细胞资源库，让广大科研工作者买的放心，用的省心！
大鼠肾小管上皮细胞哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时，可进行传代。
2)在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，收集瓶内的培养基；
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后，水平放置培养瓶，使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积，吸弃PBS；
4)向瓶内加入消化液1ml，浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min；
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起，若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中，将悬液吸入15ml离心管；
注：如还有部分细胞未消化下来，可采用分步消化：
① 准备一个无菌的15ml离心管，加入2ml含10%FBS的完全培养基；
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和（避免吹打）；
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右，轻拍培养瓶，95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和，中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min；
7)准备两个新的T-25培养瓶，各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后，弃上清，用2ml完全培养基重悬离心细胞，将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶，每个培养瓶各1ml；
9)水平放置培养瓶，震荡混匀后，将培养瓶置于37℃，5%CO2培养箱中静置培养。
冻存 （细胞冻存建议每瓶T25冻一支）
1）~6）参照传代步骤
7）离心完成后，弃上清，用1mL冻存液重悬细胞沉淀，然后转入1.8ml冻存管中；
8）将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中，之后转入-80℃冰箱中过夜降温；
9）第二天，取出降温完成的序降温盒中的冻存管，尽快转入液氮罐中保存。
产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购大鼠肾小管上皮细胞哪里买，其他相关产品
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文献和实验本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总 结，请分享！ 取材：1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法)： ①取 Wistar 大鼠断颈法处死，立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。 ②将大鼠转移入超净工作台，取腰部切口迅速取出肾脏，置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。 ③取皮质置于80目筛网上，剪碎成1-2mm3大小组织块，网下放盛有少量生理盐水的培养皿。 ④用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。 ⑤收集 80 目网下液体转移至 100
培养方法： 大鼠原代足细胞： 丁香园网友gaoxueyan99的观点为： 培养方法：过筛：100目，150目，200目，收集200目内为小球 1、选取100克左右大鼠，无菌取肾，去包膜，分离皮质，剪刀切成小块！ 2、100目上注射器芯研磨，DMEM培养液冲洗100目网筛多遍，DMEM冲洗200目内组织！ 3、离心管收集，1000转离心5分钟！ 4、完全培养基重悬沉淀，接种于培养瓶或皿！一只大鼠一皿或一瓶！ 5、5％CO2，37度培养箱最内测放置
水洗；④人孵育液，37C孵育2～4小时；⑤双蒸水洗2―3分钟；⑥入1％硫化铵液(新鲜配制)l一2分钟；⑦蒸馏水冲洗；⑧甘油明胶封固。3)结果与评价：阳性反应部位呈棕褐色硫化铅颗粒。该酶为可溶性酶，以冷固定效果较好，一般溶酶体膜为不通透性膜，但经冰冻熔化或福尔马林固定处理后，孵育液内的作用底物则进入溶酶体而被酶作用。酸性磷酸酶铅法染色大鼠肾小管上皮细胞呈棕色为酸性磷酸酶肛拦反应4)注意事项：孵育液内铅离子浓度是反应的关键因素，必须新鲜配制，立即使用。因为当铅离子浓度过低时，产生的磷酸离子未能完全被结合
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
