- ￥1290 - 3960
- 帛科
- BK-DB7081
- 国产
- 2025年07月11日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
52
- 英文名：
Recombinant Human CKM protein
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
-20 to -80 °C
- 规格：
50μg、100ug 、1mg
| 货号 | BK-DB7081 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 纯度 | >90% as determined by SDS-PAGE | 预测分子量 | 43.7 kDa |
| 表达宿主 | E.coli | 种属 | Homo sapiens (Human) |
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human CKM (Met1-Lys381) was fused with His tag
制剂: Supplied as solution form in PBS pH 7.5 or lyophilized from PBS pH 7.5.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
分子别名: Creatine kinase M-type,Creatine kinase M chain,Creatine phosphokinase M-type,CPK-M,M-CK.
背景介绍: Reversibly catalyzes the transfer of phosphate between ATP and various phosphogens (e.g. creatine phosphate). Creatine kinase isoenzymes play a central role in energy transduction in tissues with large, fluctuating energy demands, such as skeletal muscle, heart, brain and spermatozoa.
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品：
| 脑型肉碱棕榈酰转移酶1C封闭多肽 | |
| 载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B封闭多肽 | PRUNE2 Antibody Blocking Peptide |
| 表皮膜蛋白1封闭多肽 | EID1 Antibody Blocking Peptide |
| 胶质细胞谷氨酸运载蛋白1封闭多肽 | FAM98C Antibody Blocking Peptide |
| 胸腺基质淋巴细胞生成素受体封闭多肽 | Spinophilin/Neurabin 2 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化乳腺癌易感基因1封闭多肽 | ZNF851/BTBD15/ZBTB44 Antibody Blocking Peptide |
| 锚蛋白重复序列与OC盒蛋白8封闭多肽 | 5HT1D Receptor/SR-1D Antibody Blocking Peptide |
| 鸟嘌呤交换因子16封闭多肽 | GAP43 Antibody Blocking Peptide |
| 味觉受体蛋白家族2亚基16封闭多肽 | DSC3 Antibody Blocking Peptide |
| 细胞色素P450 3A5封闭多肽 | EIF5 Antibody Blocking Peptide |
| E3连接酶蛋白ARH2封闭多肽 | MIOX Antibody Blocking Peptide |
| 锌指蛋白3封闭多肽 | OR10G9 Antibody Blocking Peptide |
| 锌指蛋白37A封闭多肽 | Recombinant Human CKM proteinC3orf33 Antibody Blocking Peptide |
| CCDC88B Antibody Blocking Peptide | |
| 磷酸化组蛋白去乙酰化酶3封闭多肽 | Recombinant SARS-Cov-2 Papain-Like Protease, His |
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验Methods for Producing Recombinant Human Cellular Retinaldehyde-Binding Protein
The cellular retinaldehyde-binding protein (CRALBP) is expressed at high levels in vertebrate visual trssue, where it may serve to modulate the interaction of 11-cis -retinol with visual-cycle enzymes in the retinal pigment epithelium (RPE
Recombinant Protein Production in Yeasts
Recombinant protein production is a multibillion-dollar market. The development of a new product begins with the choice of a production host. While one single perfect host for every protein does not exist, several expression systems ranging
Recombinant Protein Expression in Nicotiana
Recombinant protein pharmaceuticals are now widely used in treatment of chronic diseases, and several recombinant protein subunit vaccines are approved for human and veterinary use. With growing demand for complex protein pharmaceuticals
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
