赛默飞世尔Thermo Fisher 10.0UM ISOP

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

离 0.1-25 kb 范围内的核酸分子。聚丙烯酰胺形成的孔径较小，可用于分离小于1 kb 的核酸分子。某些情况下，可采用聚丙烯酰胺凝胶以获得片段小于 100 bp 的单碱基分辨率[1]。 表 1. 琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶之间的差异 2. 准备标准品和样品 a .核酸标准品选择 当运行凝胶时，含有已知大小的核酸参照样品通常被称为标准品、标记或分子量标准，用于目的样品大小的估计。在为给定样品选择合适的分子量标准时，需考虑如下因素: Ladde 类型（例如 DNA 或 RNA），片段结构(例如单链或双链

一篇搞定 IP、co-IP 实验

糖，建议进行 Pre-clear；如果使用磁珠，此步可忽略 抗 X 抗体的轻链（25 kD）和重链（50 kD） 更侧重于如何在实验上进行优化（见下文） *注意：总蛋白上样量过多也会造成 非特异性结合，建议上样量为 500 ug-1 mg。上样之前一定要先用 BCA 定个量！定个量！定个量！ pre-clear：上样前先用裂解液过一遍柱子，减少基质本身对蛋白的吸附 Output：在某些 co-IP 实验中，实验人员会把IP后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测

Differential Display of Cotton Transcripts

, Madison, WI) 5X M-MuLV RT buffer (Promega, Madison, WI) 20 uM decamer primers (random) 20 uM anchored oligo-dT12MN primers (M=A,C, or G; N=A,C,G, or T) mixed dNTPs (2.5 mM each dNTP, 100 uM each dNTP Taq DNA Polymerase