054994赛默飞ProPac WCX-10 HPLC 色谱

HPLC常见问题

过高是 HPLC 柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。 拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查； 把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查。 将柱子的进出口反过来接在仪器上，用 10 倍柱体积的流动相冲洗柱子， ( 此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动性 ) 。这时，如果柱压仍不下降，再检查； 更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质

HPLC的故障及处理

(一) 保留时间变化1.柱温变化 柱恒温。2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。4.柱污染 每天冲洗柱。5.柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相。6.柱快达到寿命 采用保护柱。(二) 保留时间缩短1.流速增加 检查泵，重新设定流速。2.样品超载 降低样品量。3.键合相流失 流动相pH值保持在3～7.5，检查柱的方向，4.流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀。5.温度增加 柱恒温。(三) 保留时间延长1.流速下降 管路

如何防止HPLC或CapLC的污染

级试剂含有聚乙二醇类（PEG）化合物.紫外检测器无法检测它们的存在。 2.有些HPLC级试剂含有铁离子 (Fe+3) ii. 水可能是污染物的一个主要来源 3.必须对在线的纯水系统(Milli-Q)进行维护。18 M欧姆的水也不是完全没有有机污染物的。 4.瓶装水不一定比Milli-Q制得的水更好，因为在瓶装水开启以后，它可能会积聚污染物。 5.不推荐在塑料容器内储存水。 6.将水通过一根干净的C18色谱柱以除去有机物质而进一步纯化，这可以通过一个高压二元梯度和一根C18